全球范围内耐药细菌感染情况日益严峻,如何应对这一现状,寻找有效的抗生素替代或补充方案迫在眉睫。噬菌体作为一种古老的抗菌剂,有望作为一种替代疗法在对抗耐药细菌感染的临床应用中发挥重要作用。本课题针对一例复发性泌尿系统感染、且现有抗生素无法有效控制感染的男性患者,在伦理审核通过后进行临床噬菌体治疗。在进行四个阶段的噬菌体治疗后,患者的感染症状得到了有效控制。本次治疗共从患者体内分离到21株耐药肺炎克雷伯菌,对其进行全基因组测序分析发现均属于ST15型且单独聚为一族。使用临床分离菌株筛选、分离、纯化得到11株裂解性噬菌体,使用其中5株用于治疗。并进一步对这5株噬菌体进行了生物学特性研究及全基因组测序分析。电镜观察发现5株噬菌体均属于有尾目噬菌体。此5株噬菌体酸碱稳定性较好,对21株临床分离株的裂解谱存在差异。测序结果表明其基因组大小及序列均不同,逐一进行序列比对发现其序列一致性均小于10%,表明是5株不同的噬菌体。对其编码基因进行分析发现,3株噬菌体基因组中无抗生素抗性基因和毒力基因,JD905编码二氢叶酸还原酶X抗性基因,JD910-2编码表面抗原BspA毒力基因。提示JD905和JD910-2具有一定的安全风险。综上,本课题成功使用噬菌体鸡尾酒疗法治愈一例耐药肺炎克雷伯菌临床感染患者,为探索噬菌体的临床治疗及推广使用奠定了基础。进一步对菌株分析发现,本次感染中的菌株为多株菌的混合感染,因此使用单一噬菌体很难有效清除感染,支持了临床噬菌体治疗使用鸡尾酒疗法的必要性。在对用于治疗的5株噬菌体全面的生物学特性分析发现,噬菌体体外的裂解能力与体内有效清除能力并不完全一致。同时对噬菌体的安全评估目前仍无合适有效的方法。本研究结果表明,虽然噬菌体疗法目前可以作为紧急疗法用于多重耐药菌的临床治疗,但仍需要对噬菌体与宿主体内相互的机制进行深入的探讨以推动噬菌体疗法的临床应用。