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脑力智宝主要由龟甲、枸杞子、黄精、石菖蒲、核桃仁、当归、远志、红花等组成,用于治疗精神发育迟滞、脑瘫、癫痫、脑血管病后遗症、脑外伤后遗症、脑炎后遗症、老年性痴呆等脑病伴发的智力和肢体功能障碍,具有一定的疗效。 本文选择了氢溴酸东莨菪碱致学习记忆获得障碍、D-半乳糖致拟衰老、脑缺血再灌注损伤致学习记忆障碍、不完全脑缺血损伤致学习记忆障碍四种动物模型,PC12细胞增殖及缺血样损伤、原代培养皮层神经细胞谷氨酸损伤两种细胞模型,通过行为学、形态学观察及血液流变学、生化指标检测,研究脑力智宝对上述各种损伤的保护作用,旨在从细胞分子水平研究其益智作用的机制,为脑力智宝的临床应用提供实验依据。1.脑力智宝对氢溴酸东莨菪碱致学习记忆获得障碍小鼠的影响 观察脑力智宝(2g·kg-1、4g·kg-1、8g·kg-1)对氢溴酸东莨菪碱2mg·kg-1腹腔注射致学习记忆获得障碍模型小鼠的保护作用,结果表明该药能明显改善东莨菪碱模型小鼠的学习记忆能力,有效降低血清及脑内胆碱酯酶(AChE)的活性,并显著提高脑内谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)水平,降低γ-氨基丁酸(GABA)水平。 提示该药能增强小鼠的学习记忆获得过程,其作用机制可能与抑制胆碱酯酶合成,减少乙酰胆碱分解,提高脑内乙酰胆碱水平,并同时提高脑内Glu/GABA比值有关。2.脑力智宝对D-半乳糖致拟衰老模型小鼠的保护作用 用5%的D-半乳糖0.5ml腹腔注射连续6w复制拟衰老模型小鼠,研究脑力智宝对拟衰老模型小鼠的保护作用。结果表明脑力智宝(2g·kg-1、4g·kg-1、8g·kg-1)能明显提高拟衰老模型小鼠的学习记忆能力,并能有效提高脑指数、脾脏指数及胸腺指数,降低脑组织中丙二醛(MDA)含量及AChE活性,提高超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,同时也能明显提高拟衰老模型小鼠脑皮质单胺类神经递质去甲肾上腺素广州中医药大学硕十学位论文(NE)、肾上腺素旧)及 5.羟色胺门.HT)的合成前体色氨酸(TP)的含量。 上述结果提示脑力智宝可能通过增强机体免疫能力,提高机体抗氧化酶活性,清除氧自由基,抑制胆碱酯酶合成,减少乙酞胆碱分解,提高脑内乙酞胆碱水平,调节脑内单胺类神经递质水平,从而改善中枢神经系统的功能。3.脑力智宝对缺血性脑损伤致学习记忆障碍的保护作用 观察脑力智宝(4g·kg“’、sg·kg”’)对脑缺血再灌注损伤致学习记忆障碍小鼠的保护作用,跳台法检测结果表明脑力智宝能改善损伤小鼠的记忆能力,能显著降低小鼠脑组织中因缺血再灌注损伤而升高的MD A、一氧化氮(NO)、GIU含量,并能提高SOD及GSH.PX活性。 观察脑力智宝*g·kg“’、sg·kg’)对不完全脑缺血损伤致学习i己忆障碍大鼠的保护作用,M。tris水述宫法检测结果表明脑力智宝能明显提高不完全脑缺血损伤大鼠的空间辨别、记忆巩固、记忆再现能力。血液流变学检测结果表明脑力智宝能降低不完全脑缺血损伤大鼠的全血粘度、全血还原粘度、血浆粘度、红细胞硬性指数。生化指标检测结果显示脑力智宝能抑制大鼠不完全脑缺血损伤而引起的NO、MDA含量升高及mD活力下降。脑组织HE染色显示脑力智宝能显著减少大鼠脑缺血损伤导致的大脑皮层及海马椎体细胞层的神经细胞丢夫,神经细胞的排列、密度基本正常。利用原位末端脱氧核苦酸转移酶介导的地高辛* UTUTP缺刻末端标i己(Tunel)法检测发现脑力智宝能显著减少皮质及海马锥体细胞层凋亡细胞数。透射电子显微镜观察显示脑力智宝能减轻不完全脑缺血损伤,使大鼠海马 CA;区腑结构保持基本正常. 上述结果提示脑力智宝可通过改善血液流变性,提高脑血流量,改善微循环障碍,提高机体抗氧化酶活性,减少自由基的形成,减轻兴奋性氨基酸及NO的神经毒性作用,抑制神经细胞坏死及凋亡而改善学习记忆等脑功能。4.脑力智宝对PC12细胞增殖和缺血样损伤、原鹏养皮层神经细胞谷氨娜伤的影响 用离体培养的PC 12细胞为实验模型,通过形态学观察、MTT自动微量法检测观察脑力智宝对 PC细胞增殖的影响,结 -二- 脑力智宝益智林痴呆作用的机制研究果表明脑力智宝水煎剂及其含药血清均能不同程度地促进PC12细胞的增殖,并呈浓度和剂量依赖性。 、建立 PC细胞 NaCN加缺糖造成的缺血样损伤模型,通过形态学观察、MTT自动微量法及乳酸脱氢酶(LDH)活性检测研究脑力智宝对缺血样损伤的保护作用,结果表明脑力智宝水煎剂及其含药血清均能减轻PC12细胞的缺血样损伤,并呈浓度和剂量依赖性。 帧生小鼠大脑皮层断体外神经细胞培养,建立离体的神经细胞谷氨酸损伤模型,通过形态学观察、MT T自动微量法研究脑力智宝对原代培养皮层神经细胞谷氨酸损伤的影响。结果表明脑力智?