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目的考察西罗莫司在中国健康男性志愿者体内的药动学参数与MDR1CYP3A4*1G和CYP3A5*3基因多态性的关系,探讨这些基因位点对西罗莫司药动学的影响,初步探索基因多态性对西罗莫司临床个体化用药的指导意义。方法本试验药动学部分来自单次口服西罗莫司的生物等效性试验(n=67),建立了人全血中测定西罗莫司浓度的LC-MS/MS法,以32-去甲氧基西罗莫司为内标,液液萃取法进行样品前处理。色谱柱为Phenomenex C18(50×2.0mm,5μm),梯度洗脱,正离子检测,多离子反应监测扫描,西罗莫司m/z为931.3→864.3,内标32-去甲氧基西罗莫司m/z为901.3→816.6。健康志愿者单次口服西罗莫司5mg,于给药前及给药后0.5、1、2、3、4、6、8、12、16、24、48、72、96、120、144h取上肢静脉血5mL,获得完整的药时曲线。HRM曲线法和直接测序法测定每名志愿者MDR1、CYP3A4*1G和CYP3A5*3五个位点的基因分型。用ANOVA分析和Kruskal-Wallis Test检验分别对Cmax、AUC0-∞及Tmax与MDR1、CYP3A4*1G和CYP3A5*3基因型的关系进行统计分析。最小显著差异法(LSD)用于多组比较,P<0.05认为存在显著差异。结果1.LC-MS/MS法测定67名健康志愿者单次口服西罗莫司后的血药浓度,所得的药动学参数表现出较高的个体差异。2.MDR1C1236T、G2677T/A、C3435T、CYP3A4*1G和CYP3A5*3各位点的基因分布符合哈迪-温伯格平衡定律,并与文献报道的中国人群的频率一致。3.统计比较表明CYP3A5*3、CYP3A4*1G及MDR1C3435T基因多态性对西罗莫司的Cmax或AUC0-∞有显著影响,MDR1C1236T及G2677T/A对Cmax和AUC0-∞均无显著联系,而且所有位点的基因多态性都不和西罗莫司的Tmax有任何联系。1) MDR1C3435T位点中,CC基因型(n=31)与CT基因型(n=29)之间在Cmax观察到了显著的差异(P=0.007),野生纯合型CC基因型携带者的Cmax是变异杂合型CT基因型的1.4倍。2)统计分析结果显示,CYP3A4*1G*1G基因型携带者(n=6)与CYP3A4*1*1G基因型携带者(n=19)对SRL药动学仅在AUC0-∞之间有显著性差异(P=0.021),前者西罗莫司在全血中的暴露量是后者的1.7倍,而该位点三种基因分型的志愿者在Cmax上未观察到显著性差异。3)在CYP3A5*3位点,观察到不同基因型携带者对西罗莫司药动学参数有显著差异。带有CYP3A5*3*3基因型的志愿者(n=37)的西罗莫司的Cmax是带有CYP3A5*1*1基因型志愿者(n=6)的1.4倍,差异显著(P=0.036),但在AUCo-∞上两者未见显著差异。变异纯合型CYP3A5*3*3基因携带者(n=37)与变异杂合型CYP3A5*3*1(n=24)仅在AUCo-∞上存在显著差异(P=0.007),前者西罗莫司在全血中的暴露量达到后者的1.4倍。结论本项研究表明,LC-MS/MS法测定人全血中西罗莫司的浓度专属性强,具有快速、灵敏、准确、简便的特点,符合SFDA关于生物样品分析方法验证的要求。HRM曲线法分析MDR1、CYP3A4*1G和CYP3A5*3各位点的基因分型,方法准确简便,省时省力。CYP3A5*3、CYP3A4*1G及MDR1C3435T基因多态性显著影响西罗莫司的药动学,MDR1C1236T及G2677T/A对西罗莫司的药动学没有显著联系。本研究结果提示,在临床用药上,CYP3A4*1G和CYP3A5*3的基因信息对西罗莫司的个体化合理用药的优化可以提供帮助,CYP3A4*1G*1G基因型及CYP3A5*3*3基因型携带者需要特别关注,必要情况下可以考虑调节西罗莫司的剂量。