【摘 要】
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目的:探究不同时间点小鼠肝内泡状棘球蚴(Echinococcus multilocularis,Em)和细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)周围细胞增殖的情况。方法:从分别感染两种棘球蚴的肝组织内提取Eg和Em的原头节,进行清洗、杀菌、提纯、活性鉴定。建造小鼠肝内细粒棘球蚴和泡状棘球蚴病对比实验模型。配置5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(5-ethynyl-2’-deoxy
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目的:探究不同时间点小鼠肝内泡状棘球蚴(Echinococcus multilocularis,Em)和细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)周围细胞增殖的情况。方法:从分别感染两种棘球蚴的肝组织内提取Eg和Em的原头节,进行清洗、杀菌、提纯、活性鉴定。建造小鼠肝内细粒棘球蚴和泡状棘球蚴病对比实验模型。配置5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,Ed U)溶剂,按时注入小鼠体内。获取小鼠肝内棘球蚴周围组织并制片。HE染色:石蜡切片经处理后进行苏木素-伊红染色,在光学显微镜下观察。Ed U荧光染色:冰冻切片经过处理后,配制Click Additive Solution试剂,标记Ed U,在荧光显微镜下观察棘球蚴周围细胞增殖情况。取临床肝棘球蚴病患者标本HE染色比较。增殖细胞计数及统计学分析:利用Image J(1.8.0)软件对增殖细胞计数,采用SPSS(25.0)软件进行统计学处理。结果:HE染色可见两组棘球蚴周围细胞浸润带出现靠棘球蚴侧和靠近肝组织侧内外两层,Em内外两层细胞浸润带不规则且不连续,而Eg周围细胞浸润带较规则且连续;荧光染色可见不同时间点Eg组均比Em组周围增殖的细胞数量较多且分布较规则。Em组和Eg组周围增殖的细胞个数分别在第30d为:13.73±7.47、37.73±7.95;第60d,38.27±19.81、69.00±30.29;第90d,70.07±39.83、153.27±54.28。Eg组周围增殖的细胞个数在30d、60d、90d分别为Em组的2.75、1.80、2.19倍,小鼠肝内Em组与Eg组30d、60d、90d周围增殖的细胞数目均存在显著统计学意义(P<0.001;P<0.001;P<0.001)。结论:30d、60d及90d不同时间点,小鼠肝内Eg和Em周围细胞浸润带及增殖细胞分布存在差异,且Eg在不同时间点均比Em周围增殖细胞数量多,提示Em周围增殖细胞少可能不利于其周围内外两层细胞浸润带形成完整的囊壁。
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