BDE-209对人卵巢癌SKOV3细胞的影响及机制探讨

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目的:研究不同浓度的BDE-209对人卵巢癌SKOV3细胞是否有抑制生长的作用,以及其可能的作用原理及机制。方法:将浓度分别为5ug/ml、10ug/ml、20ug/ml的BDE-209对人卵巢癌SKOV3细胞染毒后:(1)通过MTT法观察在不同浓度BDE-209 72h内对细胞存活率的变化;(2)分别在普通光镜下和AO/EB染色后荧光显微镜下观察细胞的形态学的变化;(3)通过流式细胞术Annexin V/PI染色法观察不同浓度BDE-209在72h内对细胞早期凋亡率的影响;(4)应用黄嘌呤氧化法和硫代巴比妥酸法分别检测不同浓度BDE-209在72h内对细胞内的SOD活力、MDA含量的影响。结果:(1)通过MTT法观察发现BDE-209作用人卵巢癌SKOV3细胞的存活率有抑制作用,BDE-209在浓度10ug/ml,作用48h以上才发挥抑制作用,尤其在浓度为20ug/ml时作用最明显,与对照组在48h、72h的细胞存活率对比都有统计学差异,P<0.05。(2)BDE-209对人卵巢癌SKOV3细胞作用后的细胞形态学变化如下:在光学显微镜下细胞逐渐变圆脱落,细胞间隙增大,细胞膜的透亮度降低,在镜下变的无光泽,细胞胞浆内颗粒样及空泡状东西增多,细胞整个呈现崩解状态,尤其72h后观察形态改变较明显。AO/EB染色后荧光显微镜下表现为早期凋亡细胞膜结构完整,核仍染黄绿色,细胞质有细胞浓缩、边集现象。晚期凋亡细胞核染色质发橙红色荧光,呈固缩状或串珠状,有时核碎裂散布于胞浆中。(3)应用流失细胞术Annexin V/PI双染色测细胞凋亡结果表现为:同一时间内不同实验组与对照组细胞的早期凋亡率和坏死率都有统计学差异,P<0.05;实验组同一浓度内在不同时间内的早期细胞凋亡率和坏死率相比较也有统计学差异,P<0.05,随着时间的延长,浓度增大,早期凋亡率和坏死率都升高。(4)BDE-209对人卵巢癌SKOV3细胞作用可以引起细胞内SOD活力降低、MDA含量增加,同一时间内实验组与对照组相比有统计学差异,P<0.05,同一浓度的实验组在不同时间相比也有统计学差异,P<0.05,细胞SOD活力逐渐降低;随着时间的延长,浓度的增加,细胞SOD活力逐渐降低,MDA的含量逐渐增多,细胞氧化应激损失增多,引起细胞凋亡及坏死。结论:BDE-209对人卵巢癌SKOV3细胞的生长有抑制作用,随着浓度的增加,时间的延长,细胞凋亡和坏死增多,细胞中的SOD活力降低,MDA含量增加,细胞损失加重。
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