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目的:本实验室于上海地区的一家兔体内分离到一株国内罕见的III型弓形虫虫株并将其命名为SHR,鉴于其特殊性和国内III型弓形虫虫株研究的缺乏遂设计本实验。方法:研究内容包括五个方面:1.为了对SHR虫株基因型进行鉴定分析,本实验运用PCR-RFLP的技术,通过对4个等位基因L358,C29-2,SAG1和PK1扩增和酶切,对SHR虫株和人源(RH)共2株弓形虫虫株进行基因型的鉴定。2.为了研究四种药物治疗弓形虫III型SHR虫株感染的效果,设计实验方法如下:SHR虫株速殖子按1×104个/只经腹腔注射感染小鼠。感染后3 h,治疗药物通过灌胃法给药,首次剂量加倍,连续给药5 d,每天一次,以小鼠生存时间和存活率作为观察指标,连续观察20 d,分析阿奇霉素、磺胺氯吡嗪钠、乙酰螺旋霉素及巴龙霉素治疗弓形虫SHR虫株感染的效果,发掘治疗III型弓形虫感染的最佳药物。3.为了研究被SHR虫株感染后动物体内抗体的动态变化,设计实验方法如下:以静脉注射1×104个速殖子方式感染2只兔子,每3天收集一次血清,通过ELISA方法来研究被SHR虫株感染的兔子体内抗体的动态变化;以腹腔注射1×107个速殖子方式感染14鸡,在感染后的第3,6,9,12,15,22,29日,剖杀分离鸡的脏器(每次2只)心、肝、脾、肺、肾和脑组织(后面实验使用),并采集其血液,通过ELISA方法来研究被SHR虫株感染的鸡体内抗体的动态变化。4.为了研究SHR虫体在被感染动物体内的动态分布,设计实验方法如下:以静脉注射104个速殖子的方式感染12个兔子,每10天剖杀2只兔子,取心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和脑组织研磨并提取DNA,做Real-time PCR实验,研究被SHR虫株感染的兔子体内的虫体动态分布;用SHR虫株速殖子经腹腔注射的方式感染14只鸡,感染剂量为每只1×107个,在感染后的第3,6,9,12,15,22,29日,剖杀分离鸡的脏器(每次2只)心、肝、脾、肺、肾和脑组织并提取DNA,做Real-time PCR实验,研究被SHR虫株感染的鸡体内的虫体动态分布。结果:1.兔源弓形虫SHR虫株为III型虫株,RH虫株为I型虫株。2.结果显示:阿奇霉素的治疗效果最好,乙酰螺旋酶素的治疗效果次之,磺胺氯吡嗪钠只能显著延长被感染小鼠的死亡时间,巴龙霉素基本无治疗效果。阿奇霉素对感染了III型弓形虫SHR虫株的小鼠治疗效果最好。3.被SHR虫株感染的兔子血清抗体滴度随着感染时间的增加逐渐升高,在第18天出现第一个峰值,在第57天出现第二个峰值,本次实验为期90天,在实验结束时,抗体滴度依然保持在较高的水平状态;被SHR虫株感染的鸡血清抗体滴度随着感染时间的增加逐渐升高,在第3天后就能检测到特异的抗体,随后抗体水平迅速上升,在感染后第15天时到达最高值,随后抗体的OD值下降,在感染后的第29天OD值下降至0.3。4.SHR虫株可以感染实验涉及的兔子全部脏器和脑组织,但基于虫株感染时间长短的不同,虫体在脏器内的分布存在显著差异。在感染的第50天之后,只能在脑组织中检测到虫体,其他脏器没有虫体检出;鸡在感染后的第3天,能够检测到虫体的脏器有肝、肾、脑,在感染后的第6天,能够检测到虫体的脏器有肝,脾,肺,肾,脑;之后在任何部位都检测不到虫体。