家榆组织培养离体再生体系建立的初步研究

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本研究以家榆种子和茎段为初始材料启动培养,经过初代培养、继代培养、生根培养获得了稳定的无菌苗,并对试管苗进行了炼苗、移栽;同时通过对无菌苗的叶片、子叶、茎段及室外采集的叶片、茎段进行愈伤组织的诱导及分化,分化出不定芽继而发育成完整植株,初步建立了家榆的离体再生体系。为今后榆树基因工程改良作物和工厂化育苗提供理论依据和基础材料。主要研究结果如下:1.启动培养种子萌发过程中,无菌水和脱脂棉的组合萌发速度最快;6月中旬取材的茎段其诱导率最高;试管苗获得率为76.8%,褐化率为17.6%。2.初代培养种子胚芽分化最适合的培养基为MS+6-BA0.2mg·l-1+IBA0.025mg·l-1诱导茎段腋芽生长分化的最佳培养基为MS+6-BA0.1mg·l-1+IBA0.005mg·l-1,试管苗的分化率为79.3%,平均苗高为2.75cm,每苗叶数4.70。3.继代培养最佳的继代周期25-30d,继代增殖的最佳培养基为MS+6-BA0.1mg·l-1+IBA0.01mg.1-1,平均苗高、增殖系数分别为3.2和4.2。4.家榆试管苗生根和移栽试验表明,试管苗生根的最佳培养基为1/2MS+IBA0.05mg·l-1;平均根长2.1m,生根率67.2%。5.愈伤组织培养户外叶片最佳取材时间为4月下旬,诱导率为82.7%;叶片诱导愈伤组织最合适培养基:MS+TDZ0.1mg·l-1+IBA0.2mg·l-1,诱导率为89.2%;子叶诱导愈伤组织最合适培养基:MS+TDZ0.05mg·l-1+IBA0.1mg·l-1,诱导率为89.7%。子叶和叶片的最合适分化培养基为MS+TDZ0.2mg·l-1+IBA0.05mg·l-1平均出芽数3.8,分化率为87.6%。本试验还选取了家榆的茎段诱导愈伤组织,其诱导率最高的培养基为MS+NAA0.5mg·l-1+6-BA0.2mg·l-1,诱导率为87.6%;最适分化培养基为MS+NAA0.05mg·l-1+6-BA0.1mg·l-1,平均诱导芽数为4.2,分化率为89.0%。诱导愈伤组织的过程中,茎段的诱导率最高,子叶产生愈伤组织的速度最快。
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