论文部分内容阅读
第一部分日本血吸虫多肽SJMHE1对小鼠哮喘模型的作用研究[目的]观察日本血吸虫多肽SJMHE1对哮喘小鼠气道炎症的作用。[方法]择6～8周健康雄性BALB/C小鼠,随机分为4组:PBS组、卵清蛋白(OVA)组、OVA/PBS组,OVA/SJMHEI组。OVA致敏构建支气管哮喘模型,HE染色观察小鼠肺组织病理形态学变化,BALF计数细胞总数及嗜酸性粒细胞数,ELISA测定小鼠血清中OVA特异性IgE水平。[结果]与PBS组比较,OVA、OVA/PBS组肺组织炎性细胞的浸润增加,BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞数增加,血清OVA特异性IgE增多;与OVA、OVA/PBS组比较,OVA/SJMHE1组肺组织炎症细胞的浸润减少,BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞数减少,血清OVA特异性IgE无明显变化。[结论]日本血吸虫多肽SJMHE1可抑制哮喘小鼠气道炎症。第二部分日本血吸虫多肽SJMHE1对哮喘小鼠模型Th1/Th2/Th17/Treg调节的影响[目的]观察日本血吸虫多肽SJMHE1对哮喘小鼠模型Th1/Th2/Th17/Treg调节的影响[方法]择6～8周健康雄性BALB/C小鼠,随机分为4组:PBS组、卵清蛋白(OVA)组、OVA/PBS组,OVA/SJMHE1组。OVA致敏构建支气管哮喘模型,用qPCR(荧光定量PCR)的方法检测脾细胞和肺组织中促炎细胞因子和抗炎细胞因子变化,流式细胞术检测脾细胞中Th1、Th2、Th17、Treg细胞比例,免疫组织化学法检测肺组织中Foxp3蛋白表达水平,免疫印迹(Western b1ot)的方法测定肺组织中GATA3和RORγt蛋白表达水平。[结果]日本血吸虫多肽SJMHE1可调节哮喘小鼠脾细胞和肺组织中促炎和抗炎细胞因子的产生,降低哮喘小鼠脾细胞中Th2的百分率,增加小鼠脾细胞中Th1和Treg细胞的比例,同时增加小鼠脾细胞和肺组织中Foxp3表达量,降低小鼠肺组织中GATA3和RORγt的含量。[结论]日本血吸虫多肽SJMHE1抑制哮喘小鼠气道炎症的免疫机制可能是通过下调Th2和Th17反应并上调Th1和Treg反应。第三部分日本血吸虫多肽SJMHE1降低哮喘小鼠髓源性抑制细胞的数量[目的]观察日本血吸虫多肽SJMHE1对哮喘小鼠髓源性抑制细胞(MDSC)的影响。[方法]择～8周健康雄性BALB/C小鼠,随机分为4组:PBS组、卵清蛋白(OVA)组、OVA/PBS组,OVA/SJMHE1组。OVA致敏构建支气管哮喘模型,流式细胞术测定脾脏MDSC中多形核细胞型MDSC(PMN-MDSC)、单核细胞型MDSC(M-MDSC)所占比例,免疫组织化学染色法检测肺组织MDSC的表达。[结果]与PBS组比较,OVA、OVA/PBS组脾细胞中PMN-MDSC比例及肺组织MDSC数量增加,脾细胞M-MDSC 比例无明显变化;与OVA、OVA/PBS组比较,OVA/SJMHE1组脾细胞PMN-MDSC比例及肺组织MDSC数量减少,脾细胞M-MDSC比例无明显变化。[结论]SJMHE1可能通过减少MDSC数量抑制哮喘小鼠气道炎症。