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目的：探讨钾离子对体外培养的血管平滑肌细胞（vascular smoothmuscle cell，VSMC）和动脉血管钙化的影响，揭示钾离子调节血管钙化的分子机制。方法：1.小鼠原代血管平滑肌细胞的培养及鉴定。改良组织块法分离培养原代C57BL/6J小鼠血管平滑肌细胞，光学显微镜观察细胞形态特征；免疫组化方法鉴定VSMC特异性蛋白α-SMA的表达；RT-PCR方法检测VSMC特异性基因α-SMA和SM22α在mRNA水平的表达情况。2.钾离子对平滑肌细胞钙化的抑制作用研究。选第5代VSMC作为实验细胞，实验分为3组:正常对照组（生理磷），高磷钙化组（2.6mmol/LNaPi）,钾离子干预组(2.6mmol/L NaPi+1.0mmol/L KCL)。细胞培养十天，通过显微镜观察细胞生长情况。通过kossa染色观察细胞钙化情况。通过RT-PCR方法检测α-SMA、SM22α、ALP、BMP-2、OPG、Runx2/Cbfα1等基因在mRNA水平的表达情况。通过流式细胞仪观察细胞凋亡情况。所有实验重复3次。3.钾离子对血管钙化的抑制作用研究。分离培养C57BL/6J小鼠主动脉血管，实验分为3组:正常对照组（生理磷），高磷钙化组（2.6mmol/LNaPi）,钾离子干预组(2.6mmol/L NaPi+1.0mmol/L KCL)。培养二十天，通过Von kossa染色观察血管钙化情况。结果：1．细胞鉴定：光学显微镜下，小鼠VSMC为梭形细胞，呈典型“谷峰”样生长。抗α-SMA抗体免疫组化染色显示，VSMC包浆内可见大量棕色颗粒。RT-PCR显示α-SMA和SM22α在mRNA水平高表达。2．光学显微镜下可见：随着时间的延长，高磷钙化组细胞的透明度开始减退，絮状沉积增多，范围逐渐扩大。与高磷钙化组比较，钾离子干预组絮状沉积减少,范围缩小。细胞培养10天后进行kossa染色，正常对照组细胞无明显钙盐沉积;高磷钙化组细胞可见大量黑褐色钙盐沉积;钾离子干预组细胞钙盐沉积较轻，显示出良好的细胞钙化抑制作同。3.血管平滑肌细胞RT-PCR结果显示:与正常对照组比较，高磷钙化组ALP-1、OPG/RANKL、BMP-2、Runx2/Cbfα1的mRNA表达水平明显上调(P﹤0.01)，而α-SMA、SM22α的mRNA表达水平则显著下降(P﹤0.01);与高磷钙化组比较，钾离子干预组ALP、OPG、BMP-2、Runx2/Cbfα1的mRNA表达水平明显下降(P﹤0.01)，而α-SMA、SM22α的mRNA表达水平明显增加(P﹤0.01)。4.与正常组比较，高磷钙化组凋亡率增高(P﹤0.01)；与高磷钙化组比较，钾离子干预组凋亡率降低(P﹤0.01)。5．kossa染色显示:动脉血管培养20天后,正常组血管壁无明显钙盐沉积；高磷钙化组血管壁可见大量黑色钙盐沉积，钙化灶多分布在中外膜；钾离子干预组钙盐沉积较钙化组轻。结论：1高磷培养液可诱导血管平滑肌细胞与血管钙化。2氯化钾在体外可明显抑制高磷诱导的血管平滑肌细胞与血管钙化。3氯化钾可能通过抑制血管平滑肌细胞表型转化，降低血管平滑肌细胞的凋亡，从而阻止血管平滑肌细胞与血管钙化的发生。