紫杉醇对wnt/β-catenin信号通路中基因和蛋白表达的影响

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目的:Wnt信号通路多种肿瘤特别是结直肠癌癌变过程起着关键作用。紫杉醇类药物为人所熟知的作用是,能使微管蛋白聚集并抑制解聚,使有丝分裂停滞于G2/M期,阻断细胞的有丝分裂,进而抑制细胞增殖;除此之外,它还可以直接作用于信号通路,影响细胞中基因表达,活化多种凋亡蛋白,进而引起细胞凋亡。紫杉醇类药物抗肿瘤与wnt信号通路有无关系,这正是我们所要关注的,本实验从mRNA和蛋白表达水平探索紫杉醇类药物能或会引起wnt信号通路中基因和蛋白表达变化及可能机制。方法:1.紫杉醇对A549细胞中dkk-3、c-myc的mRNA表达的影响培养A549细胞,实验组加入紫杉醇终浓度分别为0.1、1、10nmol/L,对照组加等体积培养液,作用48小时后, RT-PCR法分别检测各组细胞dkk-3、c-myc基因表达。2.紫杉醇对A549细胞中β-catenin蛋白表达的影响于装有盖玻片的24孔板中重新培养A549细胞,实验组加入紫杉醇(终浓度0.1nmol/L),对照组未予紫杉醇处理,培养48h后,免疫组织化学法检测β-catenin蛋白表达。结果:1.紫杉醇对dkk-3、c-myc的mRNA表达的影响.实验组和对照组均可检测出dkk-3、c-myc的mRNA表达,癌基因c-myc mRNA含量紫杉醇各组较对照组均下降,而抑癌基因dkk-3mRNA表达增高(P<0.05)。2.紫杉醇对β-catenin蛋白表达的影响实验组和对照组β-catenin蛋白均有表达,A549细胞经紫杉醇干预48h后表达下降(P<0.05).结论:紫杉醇不仅能够抑制A549细胞内β-catenin蛋白表达,也能诱导dkk-3mRNA表达,从而阻断Wnt信号转导通路,影响癌基因c-myc的表达和细胞的增殖。
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