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艾地普林(Aditoprim,ADP)作为一种新型的苄胺嘧啶类抗菌增效剂,与同类兽药相比安全性更高、抗菌效果更好,其特点具有半衰期长、生物利用度高等,目前国内外都没有上市。本课题在艾地普林原料药完成中试生产及前期开展的单复方注射液研究的基础上,按照《兽药研究技术指导原则(化药、天然药物)》开展艾地普林注射液和艾地普林-磺胺甲噁唑(Sulfamethoxazole,SMZ)注射液的中试生产、产品质量研究及稳定性研究。为艾地普林单方和复方注射液一类新兽药的申报提供数据支持,为临床应用提供安全、稳定、有效的合格产品。根据药物的溶解特性,通过单因素试验优化确定注射液的组方。ADP注射液中ADP的含量为5%;辅料选用1,2-丙二醇作为助溶剂用量为30%;10%HCl为助溶剂用量为2.5%;亚硫酸氢钠为抗氧化剂用量为0.1%;尼泊金乙酯作为防腐剂用量为0.18%;注射用水作为溶剂定容至规定体积。ADP-SMZ注射液中ADP的含量为2%,SMZ的含量为10%;辅料选用1,2-丙二醇作为助溶剂用量为50%;三乙醇胺作为溶解SMZ的助溶剂用量为9%;乳酸作为ADP的助溶剂用量为2%;泊洛沙姆作为表面活性剂用量为5%;硫代硫酸钠作为抗氧化剂其用量为0.1%;尼泊金乙酯作为防腐剂用量为0.18%;注射用水作为溶剂定容至规定体积。在实验室制备工艺的基础上,对注射液的制备工艺进行优化,以注射液性状、p H、稳定性、药物含量及有关物质的量来确定各关键步骤的工艺参数。确定配液温度为40℃、搅拌时间为30 min;过滤采用0.22μm的滤膜;灭菌条件为121℃灭菌30 min。对确定的工艺进行逐步放大验证,以保证此处方工艺的安全稳定。实验室工艺验证从100 m L放大到500m L然后放大到5 L,对每批次产品按照质量检测项目进行检查,合格后进行中试生产。于2019年2月底在河南后羿实业集团有限公司,符合GMP标准的制剂车间进行ADP注射液和ADP-SMZ注射液的中试生产。ADP注射液30 L/批共三批,规格为10 m L/支,得到批号20190225的注射液2827支、批号20190226的注射液2883支和批号20190227的注射液2835支。各批次收率分别为94.23%、96.10%、94.50%。ADP-SMZ注射液150 L/批,规格为10 m L/支,得到批号20190228的注射液14165支、批号20190301的注射液14202支、批号20190302的注射液14131支。各批次收率分别为94.43%、94.68%、94.21%。制剂的质量研究是制剂组方筛选和工艺优化的重要科学基础,通过对组方和工艺优化后的结果,能为质量标准的建立提供数据支持和参考依据。本课题建立了艾地普林、磺胺甲噁唑及其有关物质的HPLC检测方法。此方法具有较高的灵敏度、较强的专属性,能适用于艾地普林、磺胺甲噁唑及其有关物质IMP-1、4-对氨基苯磺酸(Sulfanilic acid,SA)的分析检测。使用Agilent Eclipse XDB-Phenyl液相柱,柱温为30℃;紫外检测波长为283 nm,流动相为三乙胺:乙腈:水(1:150:849),使用磷酸调节溶液p H至6.50,采用等度洗脱法,流速为1.0 m L/min。在此色谱条件下,有关物质IMP-1和对氨基苯磺酸均能与主峰艾地普林和磺胺甲噁唑得到良好分离,且相邻峰之间的分离度超过1.5。按照ADP注射液和ADP-SMZ注射液的质量标准对三批中试产品进行有关项目考察。ADP注射液为淡黄色澄清透明液体,p H约为5.88,ADP药物含量为102.56%,有关物质含量为0.12%,按照制剂通则各项检测均合格,无溶血性及刺激性。ADP-SMZ注射液为浅黄色澄清透明液体,p H约为7.51,ADP和SMZ的药物含量分为101.56%和103.56%,有关物质含量为0.11%,按照制剂通则各项检测均合格,无溶血性,无刺激性。根据《兽药稳定性研究指导原则》对ADP注射液和ADP-SMZ注射液的中试产品进行1个批次的影响因素试验和3批次的加速试验和长期试验研究。其中包材稳定性试验与加速试验和长期实验一同进行。观察了注射液的外观性状,测定了p H、药物含量、有关物质含量等。结果表明在高温下,中试产品ADP注射液颜色略微加深,有关物质含量增加0.25%,需常温放置;在强光照射、低温冻融循环条件下稳定;6个月加速试验药物含量降低3.51%、有关物质含量增加0.21%、p H升高0.53;18个月长期试验结果表明,其各项质量指标符合标准。中试产品ADP-SMZ注射液在高温下颜色略微加深,有关物质含量增加0.28%,需常温放置;强光照射、低温冻融循环条件下稳定;6个月加速试验药物总含量降低2.88%,有关物质含量增加0.25%,p H升高0.47;15个月长期试验结果表明,其各项质量指标符合标准。质量研究与处方、工艺流程的研究即相互独立又存在密切联系。通过以上研究,将艾地普林原料药制备成注射液,得到安全、有效、稳定、使用方便的ADP注射液和ADP-SMZ注射液,应用于临床作为猪呼吸道、胃肠道疾病的治疗药物。本研究的总体目标是按照完整的制剂研究标准,对艾地普林单复方注射液进行科学的研制,确保制剂剂型的选择依据充分,组方合理,工艺稳定,生产过程可控,能适用于工业化生产。本注射液中试生产的成功,是将实验室研究一步步的转化为可用于实际工业生产的基础,是高校科研成果转化为临床治疗药品的保障。临床研究表明,其应用范围较广,与同类制剂相比较而言更具优势,应用前景广阔。