研究背景和目的当前，高血压已经成为危害人类健康的主要杀手，同时，血压升高又是心脑血管疾病发生的首要独立危险因素，控制血压升高是预防心血管疾病的发生、促进人类健康的重要措施。因此，开展高血压发病机制和防制措施的研究具有十分重要的意义。血管重塑是高血压血管病变的主要病理生理过程，转化生长因子β1（Transforming growth factor-β1，TGF-β1）能调节细胞的增殖和分化、胚胎形成、伤口愈合和血管再生，是参与血管重塑的重要活性因子。研究TGF-β1通路基因在高血压发病机制中的作用，进一步筛选TGF-β1通路基因及其转录调控微小RNA（miRNA）基因的遗传变异对高血压及血压变化、药物降压效果的影响，将有助于进一步阐明高血压这一复杂疾病的分子机制，并可为筛选敏感药物提供候选靶点。有动物研究证实，TGF-β1通路调节基因血管弹性纤维组件Emilin1基因和Fibrillin1基因与血管结构重塑和血管硬化有关，我们先前的人群研究也证实Emilin1基因、Fibrillin1和TGF-β1受体1（TGFBR1）基因多态性与高血压存在显著关联。因此，本研究继续选择了TGF-β1信号调控通路中TGF-β1受体2基因（TGFBR2）以及结合TGFBR2的microRNA的编码基因miR518与高血压的关系。研究采用以人群为基础的病例对照研究方法，应用标签位点（tagSNP）选择和生物学功能预测分析相结合的方法，从覆盖功能候选基因区域的人类遗传变异的重要标志——单核苷酸多态性（Single nucleotide polymorphism，SNP）中选择有代表性位点，通过关联分析筛选高血压易感SNPs，研究结果将为揭示中国人原发性高血压发病机制及其特点提供新的线索。研究对象与方法调查对象来自江苏省宜兴市官林和徐舍两个乡镇高血压流行病学整群抽样调查对象。根据《中国高血压防治指南》（2005版）的血压测量要求，对血压三次测量结果显示收缩压（Systolic blood pressure，SBP）≥140和/或舒张压（Diastolicblood pressure，DBP）≥90mmHg，或自我报告高血压史并服药或采取其他方式干预者，并排除了有继发性高血压史者，确定为高血压病例，共2012例。对照共计2210例，SBP<140且DBP<90mmHg，与病例来自同地区，按性别与年龄组（5岁-）进行匹配，同时排除报告有严重心、肺、脑、肾疾患及肿瘤者疾病史者。采用基于连锁不平衡分析的tagSNP选择和生物信息学的功能预测分析相结合的策略，将覆盖TGFBR2基因及其上游5kb及下游2kb序列纳入分析，最小等位基因频率（minor allele frequency，MAF）>0.05；分析有潜在生物学功能的SNP优先（强行）纳入，按r2>0.8筛选tagSNPs，本研究中共选择TGFBR2基因7个tagSNPs进行关联分析，同时，筛选与TGFBR2基因结合的miRNA的编码基因上的变异位点，最终选入miR518基因上MAF>0.05的SNP rs7256241位点进行分析。研究结果单位点基因型分析结果显示TGFBR2基因及miR518基因多态性与高血压的关联均无统计学意义，Logistic回归分析调整混杂因素年龄、性别、体重指数（Bodymass index，BMI）、血糖（Glucose GLU）、甘油三酯（Triglycerides TG）、胆固醇（Total cholesterol TC）、高密度脂蛋白（High-density lipoprotein cholesterolHDL-C）和低密度脂蛋白（Low-density lipoprotein cholesterol LDL-C）、吸烟和饮酒后关联也无统计学意义。进一步分层分析结果显示，在饮酒人群中，调整混杂因素后，rs9850060与高血压有统计学关联，相加模型和显性模型的OR（比值比dds ratio，OR）（95%CI）（可信区间Confidence interval，CI）分别为0.779（0.615-0.987）和0.739（0.558-0.980）；在男性人群中，rs3773661与高血压存在统计学关联，携带CC等位基因能够降低男性患高血压的风险，相加模型和显性模型的OR（95%CI）分别为0.844（0.726-0.981）和0.807（0.664-0.980）；在小于55岁年龄组人群中，隐性模型显示rs11709624与高血压存在统计学关联，OR（95%CI）为0.673（0.462-0.981）；而在非吸烟人群中，rs1155705显示携带AA等位基因能够降低高血压的患病风险，相加模型OR（95%CI）为0.896（0.803-1.000）；但上述关联经Bonferroni校正后无统计学意义。TGFBR2基因和miR518基因的多位点遗传危险评分（GRS）分析结果显示，与GRS≤P25相比，GRS>P75的人群高血压的患病风险显著降低，OR（95%CI）为0.78（0.657-0.927），P值为4.67×10-3，经Bonferroni校正后关联仍有统计学意义（P×10=0.047）。进一步分析GRS和血压水平的关联，结果显示未用药高血压对象SBP水平与GRS呈线性相关，偏回归系数β为0.248，P值为0.018，调整混杂因素后，偏回归系数β为0.212，P值为0.038。数量性状分析结果显示，在对照组中miR518基因rs7256241位点的变异与DBP水平有关，调整混杂因素后P值为0.002，同时该结果在儿童青少年人群中得到进一步验证。服用复方利血平的女性高血压病人中，rs3773661与SBP呈线性正相关，携带rs3773661CC基因型的病人SBP显著高于GC和GG基因型，调整混杂因素后仍有统计学意义（P=0.004）；rs7256241不同基因型之间DBP差异有统计学意义，校正混杂因素后P值为0.001。服用珍菊降压片的高血压病人中，rs749794与SBP和DBP水平均呈线性负相关，携带TT等位基因的病人SBP和DBP水平均低于CT和CC等位基因，调整混杂因素后P值分别为0.004和0.048；在男性病人，rs1155705和rs11709624与SBP水平呈线性负相关，携带AA基因型和CC基因型的病人SBP水平均分别低于GA和GG基因型和GC和GG基因型，调整混杂因素后P值分别为0.007和0.042；rs1036096与SBP呈线性正相关，携带TT基因型的病人SBP高于CT和CC基因型，调整混杂因素后P值为0.027；rs7256241不同基因型之间SBP差异有统计学意义，校正混杂因素后P值为0.044。服用降压片的男性高血压病人中，rs11709624与SBP呈正相关，携带CC基因型病人高于GC和GG基因型,调整混杂因素后P值为0.007；rs7256241与DBP呈线性负相关，携带GG基因型病人DBP明显低于携带TT和TG基因型，调整混杂因素后P值为0.035；rs1155705与DBP呈线性正相关，携带AA基因型病人DBP明显高于携带GG和GA基因型者，调整混杂因素后P值为0.031。病例组与对照组血清TGF-β1比较结果显示病例组sTGF-β1水平显著高于对照组（P=0.008），调整年龄和性别后P值为0.007。对照组中rs7256241不同基因型之间sTGF-β1水平呈线性负相关，差异有统计学意义（P=0.046）。结论本研究结果表明TGFBR2基因rs9850060、rs3773661、rs11709624和rs1155705与高血压有关联并受年龄、性别、吸烟及饮酒状态的影响。TGFBR2和miR518基因10个位点GRS>P75组较≤P25组能降低高血压的患病风险，未用药治疗的高血压病人SBP水平与GRS呈线性相关。miR518基因rs7256241与对照组sTGF-β1水平、成人及儿童青少年DBP存在显著关联。另外，还发现TGFBR2基因与miR518基因可能影响利血平、珍菊降压片和降压片的降压效果。