血液中的单核细胞进入组织内,分化为巨噬细胞,而巨噬细胞并非终末分化细胞,据组织微环境刺激因素不同,可以导致巨噬细胞极性(cell polarity)发生漂移,表现出不同表型和功能(?)(Gordon,2003；Kono and Rock,2008)。细胞极性是指细胞为行使特殊的生理功能,在细胞内的信号分子的不对称分布,致使细胞在表型上的不对称。细胞极性是多种类型细胞的基本特征,对多数细胞功能的发挥是必需的。具体表现为细胞的形状、脂质、细胞内的蛋白质等的不对称分布,细胞结构出现重构变化。细胞极性的改变决定巨噬细胞的外渗和迁移,进而决定其趋化性(Niggli,2003；Eddy et al.,2002)。据巨噬细胞所处微环境的不同,可将其分为Ml型和M2型巨噬细胞,在肿瘤的发生发展过程中,巨噬细胞极性会从M1型漂移到M2型,其功能从抑制肿瘤生长转变成促肿瘤血管生成、加速肿瘤的发展和转移(Sun et a1.,2006)。目前,不同极性巨噬细胞在婴幼儿血管瘤(infantile haemangioma, IH)及鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)发病过程中的作用及可能机制尚不十分清楚。本课题旨在评估M2型巨噬细胞在良性肿瘤IH发生发展中的作用及可能机制；同时探讨恶性肿瘤SCC组织中癌细胞与单核巨噬细胞相互作用,有助于开拓IH和SCC的新疗法提供新思路。本研究内容分为以下两部分：第一部分M2型巨噬细胞在婴幼儿血管瘤不同分期组织中的表达及其与促血管形成的关系目的：婴幼儿血管瘤是常见的良性肿瘤,存在特殊病理进程,其常出现在婴儿围产期,有明显的增生期和消退期。目前为止,其发病机制尚不十分清楚,本课题旨在探讨M2型巨噬细胞在其发病中的作用。方法：利用免疫组织化学方法检测M2型巨噬细胞标志CD68和CD163在20例婴幼儿血管瘤组织中的表达,统计该细胞在血管瘤不同分期中的阳性率,并分析其与Ki67、VEGF和M-CSF表达的相关性。结果：研究结果显示M2型巨噬细胞(CD68+/CD163+)主要分布于血管瘤增生期,而血管瘤消退期明显减少。增生期中M2型巨噬细胞的分布与M-CSF的表达明显相关,提示M-CSF可能参与血管瘤中M2型巨噬细胞的形成。同时,结果显示M2型巨噬细胞高浸润区域,血管瘤细胞中的Ki67和VEGF表达较高,提示：M2型巨噬细胞可能与血管瘤内皮细胞的增殖和血管生成相关。结论：M2型巨噬细胞可能通过促血管生成的作用在血管瘤特殊病理进程中起重要作用。第二部分鳞癌细胞与单核-巨噬细胞相互作用诱导其基因型和表型改变及其机制研究目的：鳞状细胞癌是最常见的头颈部恶性肿瘤,作为一种炎症相关性肿瘤,特殊的微环境可能影响肿瘤发生发展。本课题旨在通过对鳞癌细胞与单核巨噬细胞相互作用的研究,探讨其对肿瘤炎性微环境的影响及分子机制。方法：采用活细胞染色标记THP1(人急性单核白血病细胞系),分别与SACC83(人腺样囊性癌细胞系,非炎症肿瘤对照)和Ca127(人舌鳞癌细胞系)直接共培养,利用活细胞流式分选技术将共培养的细胞分离纯化,逆转录-实时定量PCR检测分析单核细胞分化及粘附相关分子的变化。同时检测共培养后的SACC83和Ca127中趋化粘附分子表达差异。建立SCC裸鼠模型来验证体内肿瘤生长微环境是否影响单核巨噬细胞分化及极性形成。采用免疫组织化学方法,检测鳞癌、腺样囊性癌和正常对照组织标本中CD68+细胞的表达水平及分布。结果：体外研究证实THP1细胞与Ca127细胞共培养比与SACC83共培养时M1和M2型巨噬细胞标记物(IL-1β、IL-6、TNF-α和MMP-9)的表达明显上调,粘附能力明显升高。THP1细胞与Ca127共培养较之与SACC83共培养表达更高水平的CXCR4和CCR-2,相应共培养的Ca127细胞较共培养的SACC83细胞表现出更高的SDF-1α (CXCR-4配体)和CCL-2(CCR-2配体)表达水平。加入AMD3100(CXCR4拮抗剂)和RS504393(CCR-2拮抗剂)的共培养体系明显抑制THP1细胞分化及粘附。体内研究结果表明THP1细胞促进肿瘤生长(P<0.05),而SCC细胞可以诱导THP1形成具有极性的巨噬细胞。免疫组织化学的结果显示鳞状细胞癌组织中CD68+细胞明显高于腺样囊性癌。结论：与腺样囊性癌相比,鳞癌细胞更能招募并促进单核巨噬细胞分化,提示这种肿瘤的炎性特征可能是其本身固有特性。