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第一部分多发性骨髓瘤细胞及间充质干细胞来源微泡的生物学特点目的：研究多发性骨髓瘤细胞RPMI8226. U266. KM3和正常人骨髓间充质干细胞(MSC)分泌的微泡(MVs)形态大小、数量、尺寸分布、表面标记及内容物组分等特点；方法：差异离心法收集骨髓瘤细胞培养上清及正常骨髓来源MSC培养上清中的细胞来源MVs,透射电镜观察其形态大小特点,蛋白质浓度测定法比较其分泌水平,流式技术分析其数量、尺寸分布及其表面的抗原标记特点；miRNA芯片技术分析MSC-MVs内miRNA组分；结果：骨髓瘤细胞及MSC细胞来源MVs在透射电镜观察下均为直径小于1μm的大小不一的囊泡状结构,其直径尺寸分布有不同特点；RPMI8226. U266. KM3三种骨髓瘤细胞24h分泌的MVs量分别为(223±15)μg·h-107cells-1,(182±11) μg-24h-1-107cells-1,(143±9)μg·24h-1·107cells-1,正常骨髓来源MSC细胞24h分泌的MVs量为(97±8) μg·24h-1·107cells-1;三种骨髓瘤细胞来源MVs均表达骨髓瘤特征性表面标记CD138,正常骨髓MSC细胞来源MVs表达MSC特征性表面标记；MSC-MVs内富含miR-16、miR-21、miR-494等多种促进造血干祖细胞自我更新的miRNA组分；结论：多发性骨髓瘤细胞及正常骨髓MSC在体外培养过程中可产生释放MVs,不同母细胞在产生MVs的数量,尺寸分布方面有所差异,MVs可携带母细胞特点的抗原标记及内容物组分。第二部分微泡在骨髓瘤细胞血清饥饿应激中的作用目的：研究血清饥饿应激(SD)条件下多发性骨髓瘤细胞分泌微泡(MVs)的差异特点,探讨其在疾病进展中的生物学意义；方法：以低浓度胎牛血清培养条件(1%FBS)予RPMI8226、U266及KM3三种骨髓瘤细胞应激处理,流式技术比较SD条件下骨髓瘤细胞释放的MVs(SD-MVs)数量、尺寸分布的差异；双向电泳及串联质谱技术研究SD-MVs的蛋白质组分改变；凝胶迁移率实验检测3D-MVs对共孵育的骨髓瘤靶细胞NF-κB活性的影响；小管形成实验检钡SD-MVs对内皮细胞血管新生能力的影响；结果：24h的SD处理没有增加RPMI8226U266和KM3三种骨髓瘤细胞的凋亡水平,RPMI8226, U266和KM3三种骨髓瘤SD-MVs数量与正常培养条件(Con-MVs)比分别增加2.5倍、4.3倍、3.8倍；SD-MVs的尺寸分布与Con-MVs比亦有明显差异；差异蛋白质组学研究数据显示ZNF224, SARM和COBL三种蛋白质在RPMI8226细胞的SD-MVs中表达明显增强,此三种蛋白质在细胞周期调控、信号转导及细胞骨架重构中有重要作用；RPMI8226细胞的SD-MVs与RPMI8226细胞共孵育有活化后者NF-κB信号通路的活性,此外PMI8226细胞的SD-MVs还有明显的促内皮细胞血管新生效应；结论：SD可诱导多发性骨髓瘤细胞释放更多MVs,SD条件下产生的MVs有明显不同尺寸分布特点,且选择性地富含某些蛋白质组分,其中ZNF224蛋白对骨髓瘤细胞在SD应激下的适应性改变有重要调控作用。第三部分间充质干细胞微泡对脐血有核细胞及造血干祖细胞的作用目的：研究骨髓间充质干细胞来源微泡(MVs)对体外培养脐血有核细胞及CD34+造血干祖细胞的增殖分化和自我更新能力影响；方法：体外培养脐血有核细胞,分为对照组、MSC-MVs共孵育组、MSC共培养组和MSC共培养+MSC-MVs共孵育组,比较各组有核细胞的增殖水平及细胞构成百分比变化；磁珠分选脐血来源CD34+细胞,以无血清培养基及细胞因子组合(SCF-1, TPO, Fltl-3)体外培养,分为对照组、MSC-MVs共孵育组、MSc共培养组和MSC共培养+MSC-MVs共孵育组,比较各组细胞增殖水平,FACS分析CD34+表型维持水平,半固体培养基分析集落形成能力、对内皮细胞的粘附能力及对SDF-1的迁移能力；检测与CD34+细胞内与造血干祖细胞自我更新及增殖分化密切相关的β-catenin水平改变；结果：MSC-MVs显著促进脐血来源有核细胞及CD34+造血干祖细胞的增殖,其可明显抑制有核细胞中T细胞、NK细胞等免疫效应细胞的增殖分化,促进单核细胞、粒细胞等髓系细胞的增殖分化。MSC-MVs促进脐血来源CD34+造血干祖细胞及集落形成细胞增殖的同时可维持其干性特征,不影响其内皮粘附能力及SDF-1迁移能力；结论：MSC-MVs在体外实验中有类似与其母细胞MSC的支持造血特性及免疫调节特性,其有望成为改善脐血造血干细胞移植术后生存的有效治疗策略。