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体内外研究表明,EGCG对前列腺癌、乳腺癌、肺癌等诸多肿瘤具有一定的防治作用。然而,EGCG的低生物利用度使其在体内难以达到抗肿瘤的有效浓度,导致其抗肿瘤机理至今尚未明确。肿瘤与免疫息息相关。肿瘤免疫逃逸,即肿瘤能够通过某些途径使宿主机体不能产生有效抗肿瘤的免疫应答,其作用机制相当复杂。其中以髓系抑制性细胞(Myeloid-Derived SuppressorCells,MDSCs)为主的负向调节抗肿瘤免疫应答的免疫抑制性细胞亚群被认为是肿瘤免疫逃逸的重要原因之一。然而,EGCG是否能通过调控MDSCs这一免疫学途径发挥抗肿瘤作用的研究却鲜有报道。在本论文中,我们通过建立高转移性癌症经典模型(4T1小鼠乳腺癌),评价EGCG在体内外乳腺癌生长的抑制作用;考察EGCG对乳腺癌小鼠体内CD11b~+Gr-1~+MDSC、CD4~+ T 和 CD8~+T 及 Treg、Arg-1 和 iNOS 的影响;并在此基础上,利用磁珠从小鼠脾脏中分选出高纯度乳腺癌诱导的MDSCs,进一步研究EGCG对MDSCs生长、凋亡及其介导免疫抑制的关键效应分子的影响。实验结果如下:1.在4T1体外实验中,EGCG能显著改变4T1细胞形态,并呈浓度依赖性地抑制4T1细胞增殖,EGCG纯度越高其对4T1细胞抑制能力越强,在浓度范围内(50μg/ml-250μg/ml),EGCG能显著抑制4T1乳腺癌细胞的侵袭和迁徙,并呈浓度依赖性地诱导4T1细胞凋亡。然而,EGCG对4T1细胞的诱导凋亡能力并不强,当EGCG浓度为250μg/ml时,其诱导4T1细胞的凋亡率仅有12.5%。2.在乳腺癌小鼠模型中,EGCG能显著抑制乳腺癌小鼠肿瘤的生长和脾脏的肿大,能呈剂量依赖效应地降低荷瘤小鼠体内各部位的CD11b~+Gr-1~+MDSCs含量,能够缓解荷瘤小鼠体内的免疫抑制状态。同时,EGCG能通过显著降低了Treg、Arg-1和iNOS的表达,提升荷瘤小鼠体内CD4~+T和CD8~+T来抑制肿瘤的免疫逃逸。3.在MDSCs的体外实验中,EGCG能通过诱导凋亡和阻滞分裂周期直接作用与MDSCs,降低其免疫抑制能力;并且EGCG下调Arg-1、iNOS、gp91和p47的表达,减少精氨酸酶和ROS的含量,促进T细胞的活化和增殖,降低T细胞凋亡;同时EGCG抑制GM-CSF、IL-6、IL-13的表达,从而阻滞MDSCs的活化;此外,EGCG能够通过抑制TGF-β、IL-10表达,降低MDSCs对Treg细胞的招募,并抑制巨噬细胞M2转化,提高T细胞活性。4.通过比较发现,MDSCs对EGCG的敏感度远高于4T1乳腺癌细胞。0.5μg/ml的EGCG处理后,MDSCs的凋亡率从空白的6.8%提升到10.7%,50 μg/ml的EGCG处理后,4T1细胞的凋亡率只有2.8%。