大肠杆菌等致病菌的近红外光谱检测方法研究

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近红外光谱检测技术是近年来发展最快的检测技术之一,具有无损、快速、高效、方便而环保的特点。本文以处于对数生长期的大肠杆菌和单增李斯特菌等致病菌为研究对象,考察了近红外光对致病菌细胞的作用机理,分析了近红外光谱分析技术的光谱预处理方法,利用基于主成分分析技术的投影判别分析对致病菌的鉴别进行了研究,得到了预期结果。1.采用光电比浊法和平板计数法,对大肠杆菌的对数生长期进行了研究。通过比较大肠杆菌的生长曲线图,研究其生长趋势,确定了大肠杆菌的对数生长期,最后选定14h为大肠杆菌培养时间。2.通过单因素试验和正交试验,对大肠杆菌细胞破碎参数进行了研究。以大肠杆菌细胞破碎率为指标,研究了大肠杆菌细胞破碎参数,确定最佳破碎参数组合为:破碎功率400W、每次破碎5s、间隔5s、实际破碎总时间50min。3.根据不同浓度梯度的大肠杆菌细胞壁和细胞质的近红外光谱,分别考察了矢量归一法、多元散射校正法、一阶导数法、一阶导数+矢量归一法等近红外分析技术的光谱预处理技术,结果表明,一阶导数法和一阶导数+矢量归一法进行光谱预处理的效果很不理想,而采用矢量归一法和多元校正法进行光谱预处理可得到满意的效果。4.利用基于主成分分析技术的投影判别分析,研究了近红外光对大肠杆菌细胞壁和细胞质的作用情况,结果表明,致病菌浓度对近红外光的吸收并不成浓度比例关系,而细胞壁和细胞质对近红外光的吸收则明显有所不同,即利用其近红外吸收光谱可以区分二者。5.采用基于主成分分析技术的投影判别分析,不论是利用细胞壁或者是细胞质的近红外光谱,都可以将大肠杆菌和单增李斯特氏菌区分开来,但采用细胞壁的近红外光谱来区分两种致病菌,准确度更高。
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