本实验以小刺猴头菌和黑木耳液体深层发酵浸膏为原料通过水提和碱提两种提取方法进行粗多糖的提取并除蛋白,并进行粗多糖中各种糖含量的测定。通过利用提取多糖的还原性末端,进行还原胺化反应,生成多糖-酪胺结合物,然后在碱性条件下与异硫氰酸荧光素(FITC)的硫氰基共价生成硫碳氨基键,从而实现多糖的荧光标记。研究实验结果如下：通过苯酚-硫酸法测定多糖的糖含量,Sevag法测定蛋白质含量,硫酸-吡啶法测定糖醛酸的含量,Morgen法测定氨基糖的含量。测定结果发现,提取的小刺猴头菌多糖和黑木耳多糖中糖含量丰富,而且还原糖含量也较多,也存在一定量的氨基糖,黑木耳多糖的糖醛酸含量大于小刺猴头菌多糖,说明黑木耳多糖的酸性比小刺猴头菌多糖强。根据本实验室的研究,糖醛酸含量多的多糖其生物学活性相对于糖醛酸含量少的多糖小的多。标记物光谱分析结果表明：两种真菌多糖均可以和FITC在胺化后进行亲核加成,达到荧光标记的目的,而且FITC的取代度实验表明,两种标记多糖的取代度均满足测试条件而且不影响多糖的总体结构,其生物活性没有改变。通过对两种标记的真菌多糖进行生物活性测试,结果表明：标记后的小刺猴头菌多糖和黑木耳多糖在体外的PBS溶液,小鼠血液,尿液中的稳定性良好,荧光强度在24h内强度稳定。体内实验初探结果表明：在用两种标记后的多糖进行了口服灌胃后,可以在小鼠的血液,尿液,粪便和肠溶物中均可以检测到荧光信号,而且在12小时内荧光强度的变化符合小鼠消化系统的变化。通过荧光活体检测技术,可以观察到,在灌胃2h内,荧光信号主要集中在小鼠消化系统内。MTT细胞毒性检测说明,标记后的多糖对人结肠癌sw1116细胞的毒性并不受荧光标记的影响。