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实验一 肠缺血再灌注对大鼠肺组织 TNF－α mRNA表达的影响 目的：本实验旨在观察TNF－α在肠缺血再灌注（GIR）大鼠循环中蛋白水平及 肺组织转录水平的表达及意义，进一步探讨GIR引起肺损伤的机制。方法：成年 SD大鼠，随机分为6组，每组8只。分别为对照组（C），只分离而不夹闭肠系膜上 动脉（SMA）；缺血组（1），阻断SMA小时，无再灌注：再灌注组（R），阻断SMA 1 小时后，开放动脉进行再灌注，依再灌注时间0．5、l、3、6小时，分为四组(R0.5、 R1、R3和R6)。实验全程监测平均动脉压（MAP）。所有动物于观察终点放血处死。 检测血清和支气管肺泡灌洗液（BALF）中的蛋白浓度（二者之比为肺通透指数）。放 免法测定血中TNF－α浓度。留取左下肺叶，一部分用作病理检查，另一部分用 反转录－聚合酶链反应（RT－PCR）进行 TNF－α mRNA测定。结果：1随再灌注时间延 长，MAP进行性下降，至再灌注6小时，R6组MAP降至实验前的47．43％（P＜0．01）。 2 C组与1组肺通透指数无显著差异（P＞0．05）；肺通透指数再灌注后迅速升高，3 小时和6小时增高尤为明显（P＜0．01）。3血中TNF－α蛋白水平于再灌注后明显升 高，1小时呈高峰表达（P＜0.01）；而后迅速回落，至6小时接近正常水平（P＜0.05）。 4 C组和 I组肺组织 TNF－α mRNA表达无显著差异（P＞0.05）；再灌注 0．5小时表达 即明显增强（P＜0.01），1-3小时是表达高峰期（P＜0.01），6小时仍显著高于C组（P＜0.01）。5病理检查发现肺间质水肿、肺出血和中性粒细胞浸润，随再灌注时间延 长进行性加重，I组则无明显形态学改变。结论：1 TNF－α是介导GIR后肺损伤 的早期一种重要细胞因子，再灌注早期血中TNF－α表达即开始增加，但维持时间 短。2 TNF－α在肺组织中表达升高的持续时间和高峰期均较血中时间长，其 在组织中高度表达可能是肺损伤的重要机制。3 GIR后肺损伤主要发生于再灌 注期间，随再灌注时间延长肺损伤进行性加重，病理表现为肺出血、间质水肿和中 二 硕士学位论文 性粒细胞浸润。