【摘 要】
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目的:以超滤技术纯化黄芪提取液,除去提取液中的悬浮物和可溶性大分子杂质。同时,将超滤技术应用于黄芪提取物的制备过程中,解决提取物成分损失大,溶解性差和生产能耗高等问题。从而为高品质黄芪提取物的工业化生产提供高效、低成本、环保的制备技术,以及为以黄芪提取物为原料的产品研发提供优质原料奠定基础。方法:首先,确定高效液相色谱法（HPLC）测定黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、黄芪甲苷含量的色谱条件,
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目的:以超滤技术纯化黄芪提取液,除去提取液中的悬浮物和可溶性大分子杂质。同时,将超滤技术应用于黄芪提取物的制备过程中,解决提取物成分损失大,溶解性差和生产能耗高等问题。从而为高品质黄芪提取物的工业化生产提供高效、低成本、环保的制备技术,以及为以黄芪提取物为原料的产品研发提供优质原料奠定基础。方法:首先,确定高效液相色谱法（HPLC）测定黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、黄芪甲苷含量的色谱条件,建立含量测定方法;以及建立紫外-可见分光光度法（UV-Vis）测定黄芪多糖含量的方法。然后,采用L9（3~4）正交设计及层次分析法,以加水量、提取时间和提取次数为考察因素,以毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、黄芪甲苷、黄芪多糖、醇溶性浸出物含量以及出膏率为评价指标,确定最佳提取工艺。其次,考察无机陶瓷超滤膜的初始膜通量以及超滤设备在相同温度、不同压力和不同转速下的错流速度,再在固定超滤温度、超滤压力和膜面错流速度的情况下,通过单因素实验,确定最佳超滤膜孔径。最后,选用优选出的最佳膜孔径,以操作压力、料液温度和膜面错流速度为考察因素,以毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、黄芪甲苷、黄芪多糖、醇溶性浸出物保留率及除杂率为评价指标,优选最佳超滤纯化工艺参数。结果:以HPLC建立的毛蕊异黄酮葡萄糖苷标准曲线为:Y=230.71X+43.821,R~2=0.9995,线性范围0.0492～0.738μg,精密度RSD为0.98%,重复性RSD为2.28%,供试品在48h内的峰面积RSD为1.18%,平均加样回收率为99.94%,RSD为2.88%;毛蕊异黄酮标准曲线为:Y=133.08X-38.364,R~2=0.9998,线性范围0.0498～0.6225μg,精密度RSD为0.63%,重复性RSD为2.51%,供试品在48 h内的峰面积RSD为1.48%,平均加样回收率为99.72%,RSD为2.79%;黄芪甲苷标准曲线为:Y=1.6506X-0.859,R~2=0.9992,线性范围52.80～792.00μg×m L-1,精密度RSD为1.02%,重复性RSD为1.47%,供试品在48 h内的峰面积RSD为2.02%,平均加样回收率为99.52%,RSD为2.81%;以紫外-可见分光光度法所建立的葡萄糖标准曲线为:Y=5.6×10-3X-0.0175,R~2=0.9994,线性范围24.65～147.90μg×m L-1,精密度RSD为0.15%,重复性RSD为2.55%,供试品在90 min内的吸光度RSD为1.07%,平均加样回收率为91.55%,RSD为2.37%。结果表明上述方法准确度高、仪器精密度良好,重复性好,可用于各成分含量测定。本文在黄芪水提取工艺和超滤纯化工艺研究过程中,以层次分析法确定各指标权重,采用正交设计,选用L9（3~4）正交试验表,优化黄芪提取工艺和超滤纯化工艺,确定最佳提取工艺条件为饮片加16倍量水（6.67倍、4.67倍、4.67倍）,提取3次,总提取时间210 min（70 min/次）;采用此工艺条件提取的黄芪提取液中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、黄芪甲苷、黄芪多糖和醇溶性浸出物含量分别可达0.2257 μg×g-1、0.1221 μg×g-1、0.9068 μg×g-1、13.52 μg×g-1和41.60 μg×g-1,出膏率为35.07%;经优化所得的超滤工艺结果表明:在选用孔径50nm的无机陶瓷膜,操作压力为0.12MPa,膜面错流速度为5.3m×s-1和料液温度为25℃条件下,其超滤效果最佳,毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、黄芪甲苷、黄芪多糖和醇溶性浸出物保留率分别可达到95.77%、96.44%、97.34%、81.90%和81.93%,除杂率为10.10%。结论:本文所建立的黄芪提取和超滤纯化工艺方法科学合理、简便可行、重复性好,有良好的工业化生产前景。
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