论文部分内容阅读
目的:成釉细胞瘤(ameloblastoma,AB)是一种常见的,良性的,生长缓慢但局部侵袭的牙源性起源的肿瘤,大多数肿瘤发生于颌骨内,高达80%的成釉细胞瘤病例发生在下颌骨且偏倚后下颌区,最常见的表现是下颌骨或上颌骨的无痛肿胀和面部变形,保守治疗导致高复发率。有助于牙齿发育的Wnt信号通路是高度保守的一条通路,在胚胎发育,细胞生长,增殖乃至肿瘤的发生,增殖,侵袭中均具有极其重要的作用,一旦发育异常可引起牙源性肿瘤的发生和发展。wnt5a是Wnt家族成员之一,可激活非经典通路Wnt/Ca2+通路。目前研究证实,该通路可以诱导细胞内Ca2+释放,Ca2+浓度的升高可以激活钙调磷酸酶(Calcineurin,CaN),使NFAT去磷酸化,进而导致T细胞转录核因子(nuclear factor of activatedT-cells,NFAT)由胞浆转位至胞核。Calcineurin(CaN)是丝氨酸/苏氨酸蛋白质磷酸酶。CaN广泛分布于不同组织和多种类型的细胞中,钙调磷酸酶-NFAT途径在不同的生物过程如T细胞活化中起关键作用,造血发育,肌肉组织发育,心脏肥大的发展和神经元极性的调节等。NFAT是CaN的反应性转录因子,NFAT家族由五个密切相关的成员组成,称为NFAT1-NFAT5。与NFAT5受渗透应力调节相反,其他四个NFAT蛋白被升高的胞质钙浓度激活。NFAT2目前被认为与恶性肿瘤的发生,发展密切相关。那么,NFAT2在AB发生发展过程中的作用如何?本实验从CaN和NFAT2入手,对AB发生发展进行初步探索。 材料与方法:88例AB存档蜡块均来自2015年至2016年中国医科大学口腔医院病理科,诊断标准依据WHO2005分类,以12例KCOT、20例正常口腔黏膜(NOM)做对照,用免疫组化SP法观察CaN和NFAT2蛋白在AB中的表达分布。18例AB新鲜手术标本于-80℃冻存,以7例NOM做对照,检测CaN和NFAT2蛋白的表达水平;用Real-time PCR方法,以管家基因β-actin校正,检测CaN和NFAT2 mRNA的表达水平。 结果:1、CaN与NFAT2在AB中高表达,阳性表达率为88.64%(78/88);它们分布于肿瘤性上皮细胞的胞质中,炎性淋巴细胞阳性,偶见细胞核的阳性染色,破骨细胞阳性。CaN在NOM中阳性表达率为35%(7/20),NFAT2在NOM中阳性表达率为45%(9/20)。2、CaN与NFAT2在AB各型中表达无明显差异。3、经秩和检验CaN与NFAT2在AB中的表达明显高于在NOM中的表达。4、经过相关性的分析,CaN和NFAT2的表达呈正相关,r=0.75,p<0.05。5、AB中CaN和NFAT2基因Real-time PCR的检测结果是CaN mRNA在ABs中的表达水平相对于NOM中高了2.22倍。NFAT2 mRNA在AB中的表达水平比NOM高1.69倍。 结论:在中成釉细胞瘤中CaN和NFAT2高表达并呈现一定的正相关提示二者可能参与成釉细胞瘤的发生发展。