【摘 要】
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第一部分:肺癌干细胞分离鉴定实验 目的:验证所分离的SP+、CD24+IGF-1R+、CD133+细胞是否具有肺癌干细胞特性。 方法:采用浓度梯度稀释实验及成球能力实验,验证所分离的SP+
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第一部分:肺癌干细胞分离鉴定实验 目的:验证所分离的SP+、CD24+IGF-1R+、CD133+细胞是否具有肺癌干细胞特性。 方法:采用浓度梯度稀释实验及成球能力实验,验证所分离的SP+、CD24+IGF-1R+、CD133+细胞是否具有肺癌干细胞特性。 结果:仅需少量的SP+、CD24+IGF-1R+、CD133+细胞即可导致裸鼠肿瘤生长、体外增殖形成肿瘤球。 结论:分离的SP+、CD24+IGF-1R+、CD133+细胞具有肺癌干细胞特性,我们采用的技术可以分离、检测到实验所需的肺癌干细胞。 第二部分:双黄升白颗粒调控骨髓造血干细胞及肺癌干细胞增殖分化的研究 目的:观察双黄升白颗粒对化疗所致骨髓抑制细胞周期的调控作用:观察双黄升白颗粒对骨髓造血干细胞及肺癌干细胞的调控作用;初步建立双黄升白颗粒治疗肿瘤化疗骨髓抑制的microRNAs图谱。 方法:采用A549肺癌荷瘤裸鼠,腹腔注射环磷酰胺(CTX)造成肿瘤化疗骨髓抑制模型,使用双黄升白颗粒进行治疗。检测血常规、骨髓及肿瘤细胞周期、计算增殖指数(PI)、骨髓造血干细胞及肺癌干细胞流式阳性率等常规指标,microRNAs芯片分析双黄升白颗粒调控骨髓造血干细胞及肺癌干细胞的作用靶点。 结果:双黄升白颗粒组白细胞计数、肿瘤细胞中处于G0/G1期的百分比、骨髓细胞PI较CTX组高,而骨髓细胞中处于G0/G1期的百分比、肿瘤细胞PI较模型组低(P<0.05);双黄升白颗粒组CD34+SCA-1+骨髓造血干细胞流式阳性率高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05),但是其SP+、CD24+IGF-1R+、CD133+肺癌干细胞流式阳性率低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);双黄升白颗粒组与CTX组骨髓及肿瘤干细胞中表达有差异的microRNAs共计有300余种。 结论: 1、双黄升白颗粒对化疗所致骨髓抑制期的A549肺癌荷瘤裸鼠的骨髓及肿瘤细胞周期具有调控作用; 2、双黄升白颗粒对骨髓造血干细胞及肺癌干细胞的增殖分化具有调控作用; 3、双黄升白颗粒对干细胞的调控作用可能是通过调控相应microRNAs的表达实现的。
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