目的:骨关节炎是影响人类健康的临床常见疾病之一，临床表现为关节疼痛进行性加重，直到活动受限、关节变形。威灵仙具有明确的祛风湿止痹痛的作用，前期研究已筛选出《中华人民共和国药典》（简称《中国药典》）收录的三种威灵仙来源中，东北铁线莲的抗炎镇痛作用更优，因此本研究所用威灵仙均用东北铁线莲。本实验研究和比较威灵仙不同提取部位的抗炎镇痛活性，并对作用最强的有效部位进行了进一步的分离纯化和鉴定，以期发现威灵仙抗炎镇痛活性部位;结合抗炎指标优化水蒸气蒸馏法提取威灵仙挥发油的工艺。
　　方法:1.对实验用威灵仙按《中国药典》2015版标准进行了水分、灰分、浸出物、薄层色谱鉴别及齐墩果酸含量测定。2.将威灵仙经提取、萃取、浓缩得到石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位。3.将实验用小鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组和用药组，用药组分别设四个提取部位的高中低剂量组，分别采用小鼠醋酸扭体疼痛模型和二甲苯致小鼠耳肿胀模型评估4个提取部位的镇痛活性和抗炎活性。RAW264.7细胞分为Conrtol组、脂多糖组和用药组，用药组分别设四个提取部位的高中低剂量组，用脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症模型评估4个提取部位抗炎活性。4.对效果最优的提取部位利用硅胶柱层析分离纯化，将分离所得化合物进行鉴定，并与文献进行比对。5.以挥发油提取率、NO抑制率和两者的加权评分为指标，通过正交试验考察过筛目数、药液比和回流时间对威灵仙挥发油的水蒸气蒸馏法提取工艺的影响，优选最佳实验方案。
　　结果:1.实验用威灵仙饮片表面呈棕黑色，断面木部近圆形，呈淡黄色，味辛辣;薄层色谱分析，供试品与对照品在相应的位置上，显相同颜色的斑点;供试品中水分含量均值为9.6％，浸出物含量均值为15.4％，总灰分均值为9.44％，酸不溶性灰分均值为3.92％，供试品中齐墩果酸含量0.38％。2.实验用威灵仙萃取后得到石油醚部位49.8g，氯仿部位154.3g，乙酸乙酯部位297.4g，正丁醇部位1209.6g。3.在镇痛实验中，乙酸乙酯部位对小鼠扭体的抑制率最高(乙酸乙酯中剂量组61.91％，高剂量组61.27％，阳性对照组57.59％);抗炎实验结果显示乙酸乙酯组对NO呈浓度依赖性抑制，且浓度为60μg/ml时抗炎效果最好。4.乙酸乙酯部位分离纯化后得到了四个化合物，经波谱数据鉴定有2个化合物:3-羟基-4甲氧基肉桂酸(1);5-羟基-4-氧代戊酸(2)，经与文献比对确定均为已知化合物，且均为首次从东北铁线莲中分离得到。5.在优选水蒸气蒸馏法提取威灵仙挥发油的工艺中，各因素对挥发油提取率、NO抑制率和加权评分的影响顺序为过筛目数＞药液比＞回流时间;最佳提取工艺为过筛目数3＃，药液比1∶10，回流时间12h;挥发油提取率0.072％，NO抑制率117.411％，加权评分97.979。
　　结论:实验用威灵仙符合2015版中国药典规定标准;威灵仙不同部位的抗炎镇痛效果不同，其中乙酸乙酯部位抗炎镇痛活性最强。乙酸乙酯部位分离纯化后的两个化合物:3-羟基-4甲氧基肉桂酸(1)、5-羟基-4-氧代戊酸(2)，均为已知化合物，且均为首次从东北铁线莲中分离得到。水蒸气蒸馏法提取的威灵仙挥发油具有显著的抗炎作用，优化的工艺稳定可靠。