烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)是世界性植食性刺吸式害虫,其中B型和Q型是我国主要的入侵物种,寄主范围高达600多种,可传播208种植物病毒,其中瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)就是由B型和Q型烟粉虱以半持久性方式传播的一种病毒。CCYV属于毛形病毒属(Crinivirus),是近年来报道的一种新病毒,烟粉虱传播该病毒的特性目前尚无文献报道。本研究以Q型烟粉虱和CCYV为试验材料,建立了一种高灵敏性的实时荧光定量方法,可检测单头烟粉虱及寄主植物的带毒情况,研究了烟粉虱传播该病毒的特性。本研究取得的主要结果如下:(1)本研究通过建立并优化实时荧光定量RT-PCR体系,以含有目的片段的标准重组质粒作为模板绘制标准曲线,进行灵敏度、重复性试验和单头烟粉虱中CCYV含量检测。结果表明建立的real-time RT-PCR具有较高的灵敏性,比常规RT-PCR方法检测灵敏度高100倍。CCYV在烟粉虱体内的最低检测限为1.34×104拷贝,单头烟粉虱获毒3d后CCYV含量多集中于104-106拷贝,最高带毒量为1.09×107拷贝。(2)以建立的real-time RT-PCR方法检测单头烟粉虱和寄主植物的带毒情况,应用于测定烟粉虱传播CCYV的获毒时间、持毒时间、传毒效率和接种病毒时间。结果表明烟粉虱最短获毒时间为1h,获毒48 h后带毒率为100%;烟粉虱最长可在体内保持该病毒12d;烟粉虱传毒效率较低,需要30头烟粉虱才能达到较高的传毒效率;30头烟粉虱接种病毒1 h不能成功传播该病毒,接种病毒6 h时传毒效率较低,接种病毒24 h以上达到较高的传毒效率。我们的结论证实CCYV是由烟粉虱以半持久性方式传播。本研究将为系统阐明烟粉虱传播CCYV病毒机理开辟道路,进而为病毒防控奠定基础。