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目的:研究DKK1对自发性高血压大鼠尿钠排泄及血压的影响及机制。方法:1.Wnt/β-catenin信号在血压调节中作用已被认可,但其典型抑制剂DKK1在高血压中的作用尚不清楚。本研究中,选取高血压患者109名和30名血压正常对照组。液相蛋白芯片检测血清Dickkopf相关蛋白1(DKK1)水平。2.DKK1对尿钠排泄的作用及其机制。2.1.采用免疫印迹和免疫组化的方法观察DKK1在正常大鼠(Wistar Kyoto rats,WKY)及自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)肾脏及肾小管上皮细胞(renal proximal tubule epithelial,RPT)中的表达。2.2.12只WKY随机分成WKY+DKK1组和WKY对照组(n=6);12只SHR随机分成SHR+DKK1组和SHR对照组(n=6);WKY+DKK1组和SHR+DKK1组微泵泵入重组DKK1蛋白(DKK1)。采用无创鼠尾测压仪测血压;代谢笼收集24小时尿量;检测尿钠浓度,计算24小时尿钠排泄情况,并用体重校正,明确DKK1是否对尿钠及血压有影响。并检测肾组织钠-钾-ATP酶活性。2.3.明确DKK1对钠-钾-ATP酶的作用。在WKY-RPT和SHR-RPT细胞中外源性加入重组DKK1蛋白,以及用siDKK1干扰DKK1表达,观察钠-钾-ATP酶活性变化。3.明确DKK1是通过Wnt/β-catenin信号通路调控钠-钾-ATP酶活性。3.1.RPT细胞内加入重组DKK1蛋白同时加入GSK3β抑制剂(BIO),检测钠-钾-ATP酶活性。3.2.在siDKK1干扰RPT细胞同时使用β-catenin核转录抑制剂(ICRT 14)抑制β-catenin核内信号转录,检测钠-钾-ATP酶活性。结果:1.数据显示,高血压患者血清DKK1浓度明显低于对照组。在对年龄、BMI、FBG、HbA1c、HDL-C和eGFR进行调整后,高血压与DKK1蛋白水平独立相关。高血压患者血清DKK1水平下降与高血压风险有关。2.DKK1能降低钠-钾-ATP酶活性增加尿钠排泄。2.1.研究显示WKY大鼠肾脏组织及WKY-RPT细胞上DKK1表达水平高于SHR大鼠。2.2.外源性DKK1蛋白增加了SHR大鼠的尿钠排泄,降低了SHR大鼠血压。外源性DKK1对WKY大鼠尿钠排泄和血压没有作用。但WKY+DKK1和SHR+DKK1肾组织钠-钾-ATP酶活性均呈降低趋势。2.3.RPT细胞外源性加入重组DKK1蛋白后WKY+DKK1、SHR+DKK1组与WKY、SHR组相比钠-钾-ATP酶活性下降。siDKK1转染RPT细胞后检测钠-钾-ATP酶活性发现,WKY+siDKK1、SHR+siDKK1组与WKY、SHR组相比钠-钾-ATP酶活性升高。3.DKK1通过Wnt/β-catenin信号通路调控钠-钾-ATP酶活性。3.1.GSK3β抑制剂(BIO)逆转了DKK1蛋白引起的钠-钾-ATP酶活性降低的现象。3.2.β-catenin核转录抑制剂(ICRT 14)逆转了siDKK1引起钠-钾-ATP酶活性升高的结果。结论:血清较低的DKK1与高血压相关,且在自发性高血压大鼠中DKK1通过Wnt/β-catenin信号调节钠-钾-ATP酶活性,影响尿钠排泄,从而调节血压。