α2巨球蛋白(α2M)在实验性视网膜新生血管形成中的表达和意义

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目的:探讨a2巨球蛋白(alpha 2 macroglobulin,a2M)在实验性性小鼠视网膜新生血管中的表达和意义。 方法:①建立氧诱导小鼠视网膜病变模型(oxygen-inducedretinopathy,OIR):将7日龄C57BL/6J小鼠随均分为空白对照组和高氧组,应用HE染色观察视网膜形态学改变,计数突破视网膜内界膜的内皮细胞数。 ②a2M对视网膜新生血管的影响:将54只C57BL/6J小鼠随机分为高氧组、给药组和对照组,每组18只。建立氧诱导视网膜病变的小鼠模型。对照组于正常氧环境中喂养。给药组中分别于出生后12天(P12)和14天(P14)行双眼球后注射Avastin 2μl;高氧组和对照组则于相同的时间段内球后注射等量的生理盐水。所有小鼠于出生后17天(P17)处死,行视网膜切片HE染色,计数各组小鼠突破视网膜内界膜的内皮细胞核数;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定视网膜中a2M的表达;免疫组织化学法检测视网膜中VEGF的表达。 结果:①高氧组视网膜大量新生血管形成,突破视网膜内界膜的内皮细胞数为85.23±5.18,对照组突破内界膜的内皮细胞计数分别为0.8±0.72,两组间相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。 ②高氧组视网膜大量新生血管形成,突破视网膜内界膜的内皮细胞数为80.75±3.78,给药组和对照组突破内界膜的内皮细胞计数分别为35.41±9.37和0.9±0.54,各组间分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组视网膜中a2M的ELISA检测结果:高氧组为(0.940±0.238)mg/L,给药组为(0.876±0.551)mg/L,对照组为(0.269±0.095)mg/L,各组间分别比较差异均有统计学意义(P<0.05)。视网膜免疫组织化学染色显示,VEGF在对照组小鼠的内核层细胞和神经节细胞中的细胞浆有微弱的表达,高氧组和给药组视网膜组中二者的表达均有不同程度的升高,各组间分别比较差异均有统计学意义(P<0.05)。a2M和VEGF的两者表达显著相关(r=0.845,P<0.05);a2M/VEGF:高氧组与给药组相比差异无统计学意义(P>0.05),两者分别对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论: ①.采用氧诱导小鼠视网膜病变的模型能成功建立视网膜新生血管病变的动物模型。 ②.VEGF增高与视网膜新生血管形成有关。 ③.Avastin能有效抑制视网膜新生血管的形成。 ④.a2M参与了视网膜新生血管形成的病理过程,可能在视网膜新生血管的形成过程有重要作用。
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