【摘 要】
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目的:白藜芦醇是一种植物抗毒素,也是非黄酮类多酚化合物,具有很强的生物学活性。白藜芦醇自从被发现以来,一直受到医学相关专业研究者的重视,目前已证实其对预防和治疗心血
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目的:白藜芦醇是一种植物抗毒素,也是非黄酮类多酚化合物,具有很强的生物学活性。白藜芦醇自从被发现以来,一直受到医学相关专业研究者的重视,目前已证实其对预防和治疗心血管疾病具有重要意义。本实验的目的在于研究白藜芦醇预处理对H9c2心肌细胞A/R损伤后VDAC1蛋白乙酰化的影响以及与SIRT1通路的关系。方法:本实验用H9c2细胞株为实验对象,模拟体内缺血再灌注损伤模型,构建缺氧复氧损伤模型。采用免疫沉淀法及免疫印迹(Western Blotting)法检测SIRT1、VDAC1、acetyl-VDAC1、Cyt c、Bax和Bcl-2蛋白的表达;用分光光度法测定CPK、LDH、SOD、MDA和GSH-Px的活性;用流式细胞仪测定线粒体膜电位(Δψm)、活性氧(ROS)和细胞凋亡。结果:1.白藜芦醇预处理后,Western Blotting法测得VDAC1、acetyl-VDAC1以及Bax蛋白表达量较A/R组明显下调;SIRT1和Bcl-2蛋白表达量较A/R组显著上调(p<0.05);2.与白藜芦醇预处理组比较,使用SIRT1抑制剂Ex527可降低VDAC1去乙酰化水平,细胞存活率明显降低,CPK和LDH活性升高,MDA水平升高,SOD和GSH-Px活性降低(p<0.01);3.应用Ex527抑制SIRT1活性,抑制VDAC1去乙酰化后,细胞内ROS水平显著升高,线粒体膜电位稳定性下降,Cyt c释放量增多,细胞凋亡数增多(p<0.01)。结论:白藜芦醇通过激活SIRT1,促使VDAC1蛋白去乙酰化,从而抑制线粒体凋亡通路,减少细胞凋亡,对抗心肌缺氧复氧损伤。
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