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本文以白杨杂种三倍体‘北林雄株1号’以及‘北林雄株2号’新品种为材料,在建立茎段以及叶片离体再生体系的基础上,开展施加秋水仙碱处理诱导‘北林雄株1号’、‘北林雄株2号’离体叶片细胞染色体加倍技术研究,为创造白杨六倍体新种质奠定基础。有关研究结果如下:1.建立了白杨杂种三倍体‘北林雄株1号’以及‘北林雄株2号’无菌体系。研究表明:以一年生根萌苗的半木质化嫩枝为外植体,启动培养最佳的消毒处理方法为20%的84消毒液处理20min,此时‘北林雄株1号’和‘北林雄株2号’外植体萌芽率均最高,分别为80.0%、76.7%。2.建立了白杨杂种三倍体‘北林雄株1号’以及‘北林雄株2号’茎段再生体系。研究表明‘北林雄株1号’、‘北林雄株2号’茎段增殖及生根培养条件均存在一定的差异,其中‘北林雄1号’茎段适宜的增殖培养基为MS+0.3mg/L6-BA+0.05mg/L NAA,适宜生根培养基为1/2MS+0.6mg/L IBA;‘北林雄株2号’茎段适宜的增殖培养基为MS+0.4mg/L6-BA+0.05mg/L NAA,适宜生根培养基为1/2MS+0.5mg/L IBA。茎段再生体系的建立对于‘北林雄株1号’和‘北林雄株2号’新品种推广应用具有重要意义。3.建立了白杨杂种三倍体‘北林雄株1号’以及‘北林雄株2号’叶片不定芽诱导再生技术体系,为后续的叶片离体染色体加倍打下基础。外源激素6-BA以及TDZ对‘北林雄株1号’叶片不定芽诱导率以及发生系数的影响显著,NAA对叶片不定芽诱导率影响不显著,对发生系数的影响极显著,筛选出‘北林雄株1号’叶片不定芽诱导的适宜培养基为MS+0.2mg/L6-BA+0.1mg/L NAA+0.005mg/L TDZ,叶片分化率可达79.2%;外源激素6-BA、NAA以及ZT对‘北林雄株2号’叶片不定芽诱导率和发生系数的影响均达到了显著水平,筛选出‘北林雄株2号’叶片不定芽诱导的适宜培养基为MS+1.0mg/L6-BA+0.05mg/L NAA+1.2mg/L ZT,叶片分化率可达86.7%。4.采用秋水仙碱溶液浸泡法对‘北林雄株1号’以及‘北林雄株2号’离体叶片进行染色体加倍处理,成功的获得了六倍体植株。以‘北林雄株1号’为材料的六倍体诱导最佳处理组合为预培养3d的叶片在100mg/L秋水仙碱液体培养基中处理96h,最高六倍体植株诱导率为3.57%,共获得7株六倍体;以‘北林雄株2号’为材料的六倍体诱导最佳处理组合为预培养2d的叶片在100mg/L秋水仙碱液体培养基中处理96h,最高六倍体植株诱导率为1.83%,共获得4株六倍体。