在女性妇科恶性肿瘤中,宫颈癌是最常见的恶性肿瘤,其发病率逐年上升,年轻患者和腺癌的比例增加,在中国目前每年有大约有13万的新增病例。而且宫颈癌是众多恶性肿瘤中较少的几种有较为有效的早期筛查手段。宫颈细胞学检查可以区分出宫颈上皮内瘤样变和宫颈癌病变和宫颈炎性改变,虽然有一定的假阳性和假阴性,但是其准确性比较可靠,根据细胞学的检查结果,可以进一步采取更为准确有效的宫颈活检而进一步确诊,所以目前诊断为宫颈癌的患者大多数都处于早中期,仍然具有手术切除病灶的机会。目前宫颈癌手术的方式比较经典的方法是广泛全子宫和双附件切除加盆腔淋巴结清扫术,这将导致女性卵巢功能的彻底完全丧失。在女性,卵巢的生殖内分泌功能对于其生理和病理过程中起着非常重要的作用,尤其是年轻女性。而其中关键性的因素就是卵巢能够产生和分泌雌激素,雌激素对于女性体内的一序列生理病理变化起着不可替代的作用。而对于宫颈癌患者进行根治手术之后导致卵巢功能的丧失是永久性的,不可逆的。对于这这部分患者能否进行雌激素替代治疗仍然未有一个确定性的结论。雌激素对于宫颈癌的影响仍然具有争议性的。国内外的报道有提示雌激素增加宫颈癌的发生,也有提示对宫颈癌的发生无关。纵观众多的研究,但是未见关于雌激素对于宫颈癌转移和侵袭能力的相关影响的研究报道。本研究拟利用体外细胞培养技术,选择俩种研究最为广泛的宫颈癌细胞株HeLa细胞(宫颈腺癌来源)和SiHa细胞(宫颈鳞癌)为研究对象,在基因和蛋白水平检测关于侵袭能力的相关基因的变化,了解雌激素对宫颈癌的侵袭和转移是否有影响以及影响的可能机制。目的：探讨17β雌二醇对宫颈癌细胞株HeLa和SiHa生物学行为的影响,了解其可能机制方法：采用MTT法检测雌二醇对俩种细胞株增殖的影响；流式细胞仪检测雌二醇对俩种细胞株凋亡的影响；RT-PCR和实时定量PCR检测雌二醇对MMP2、MMP9及其抑制剂TIMP1、TIMP2表达的影响；明胶酶谱法检测雌二醇对俩种细胞株明胶酶分泌的影响；Transwell小室法检测雌二醇对其迁移和侵袭的影响。结果：10nM和100nM浓度的雌二醇显著促进HeLa细胞的增殖,而1nM浓度的雌二醇无明显促HeLa细胞增殖；雌二醇只是在100nM浓度有轻度促SiHa细胞增殖作用,而1nM和10nM无明显促SiHa细胞增殖作用。10nM雌二醇使HeLa细胞的晚期凋亡率和总凋亡率下降,而对早期凋亡率无显著影响,10nM雌二醇对SiHa细胞的早期凋亡率、晚期凋亡率和总凋亡率无明显影响,差异无显著性。RT-PCR和实时定量PCR结果显示HeLa细胞表达MMP9而不表达MMP2,SiHa细胞与之相反,并且使用雌二醇干预之后仍然如此；俩种细胞都表达TIMP1和TIMP2;雌二醇促进HeLa细胞MMP9的表达抑制TIMP2的表达；而雌二醇对SiHa无明显促进MMP2的表达,但是促进TIMP2的表达。明胶酶谱法结果显示HeLa细胞有MMP9的分泌而无MMP2的活性显示,而SiHa细胞分泌MMP而MMP9的活性显示；雌二醇可以促进HeLa细胞分泌MMP9但是对SiHa细胞MMP2的分泌活性无明显变化。Transwell小室检测结果显示雌二醇促进HeLa细胞的迁移和侵袭,但是对SiHa细胞的迁移和侵袭能力无显著影响。结论：雌二醇促进HeLa的增殖抑制其凋亡,高浓度雌二醇轻度促进SiHa细胞的增殖；雌二醇促进HeLa细胞的迁移和侵袭,可能是通过促进MMP9的表达抑制TIMP2的表达来实现。目的：建立肿瘤来源的微淋巴管内皮细胞的原代培养方法,并了解其对肿瘤细胞的相互影响。方法：(1)胶原酶消化新鲜卵巢肿瘤组织标本过滤得单细胞悬液,免疫磁珠分选法筛选LYVE-1阳性细胞贴壁培养。(2)应用免疫荧光法检测淋巴内皮细胞标记分子CD31,D2-40, LYVE-1和VEGFR3。(3)持续传代培养,观察其形态和增殖速度的变化。(4)结合临床资料分析影响培养效果的因素。结果：(1)免疫磁珠分选法可以成功分选出纯度较高的淋巴内皮细胞。(2)分选出来的细胞表达CD31,D2-40, LYVE-1和VEGFR3,其纯度可以达到90%以上。(3)原代培养的淋巴内皮细胞可以传代到7代以上,随着传代次数的增多,尤其是第5代以后细胞增殖明显变缓,细胞形态开始发生变化。传代到第七代细胞形态明显衰老,细胞空泡较多,生长缓慢(4)细胞培养成功的关键与肿瘤组织标本的类型和患者的年龄密切相关(p<0.05)。结论：免疫磁珠分选法可以分选出较纯的淋巴内皮细胞,性状稳定,可以用于后续的研究。