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根结线虫(Meloidogyne spp.)是严重危害世界农业生产的一类植物寄生线虫,目前,根结线虫病的防治主要是利用化学防治方法为主,本试验着力从葫芦科、茄科根结线虫上分离筛选获得细菌菌株,研究其对根结线虫的杀线活性,主要取得以下研究成果:
(1)从根结线虫雌虫、幼虫及卵上分离筛选具有防治根结线虫能力的细菌菌株,共分离得到根结线虫相关的携带细菌128株,通过菌株对根结线虫二龄幼虫致死性及卵孵化抑制测定试验,筛选出对根结线虫具有活性的4株菌株,分别为HNXG-5菌株、PYFQ-4、PYFQ-5菌株、NSKG-3菌株,其中HNXG-5菌株具有最高的杀线虫活性,校正死亡率达到95.33％,其他3株均达到80.00%以上。
(2)对4株具杀线虫活性菌株进行种类鉴定。在进行细菌的形态学观察和生理生化鉴定的基础上,对菌株16S rDNA基因进行PCR扩增测序并构建系统进化树,鉴定4株菌株分别为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HNXG-5、解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)NSKG-3,蜡质芽孢杆菌(B.ceTeus)PYFQ-4,和巨大芽孢杆菌(B.megaterium)PYFQ-5。
(3)对具有高杀线虫活性的枯草芽孢杆菌HNXG-5菌株做了进一步研究:用枯草芽孢杆菌HNXG-5菌株处理南方根结线虫的二龄幼虫和卵,结果表明:1×109浓度菌悬液及上清液原液处理二龄幼虫24h,死亡率分别比对照高87.67%和94.00%。用菌悬液及上清液分别处理卵,高浓度上清液均能抑制卵的孵化,而10倍稀释上清液对卵孵化有促进作用:菌悬液随着浓度降低及处理时间的增长,抑制孵化率降低,处理10d后均表现明显的促进卵孵化的作用。而对其他如松材线虫(Bursaphelenehusxylophilus)、象耳豆根结线虫(M.enterolobii)、爪哇根结线虫(M.javanica)都表现一定的杀线虫活性。
(4)HNXG-5菌株的盆栽试验表明:分别在接种线虫前和接种线虫后5d接种不同浓度的细菌菌液均能明显抑制根结线虫病的发生,灌根时间不同对防效影响较大,在接虫前后接浓度为1×108的菌液,防治效果分别为81.26%和67.12%,并且均能促进番茄植株的生长。