活性结构域hPK-5因子原核基因工程制备及其生物学活性研究

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:laoshuzhuimao
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目的:1.构建hPK-5因子原核基因工程表达载体;2.筛选hPK-5因子高效表达菌株、优化表达条件;3.建立hPK-5因子分离纯化工艺;4.建立体外检测复性蛋白质活性的方法.结论:分别构建了hPK-5因子可溶性和不溶性原核表达载体,并在工程菌株中获得了表达;筛选得到的hPK-5高表达菌株和发酵工艺可以较好地提高目标蛋白的表达量;鸡胚绒毛尿囊膜实验证实,经分离纯化和体外复性的hPK-5因子恢复了野生活性,证明了原核细胞表达出的未经糖基化的蛋白质也具有生物学活性,验证了利用原核基因工程在体外大量生产hPK-5因子这一技术路线的可行性,也为基础研究和应用研究奠定了实验基础.
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