运用热带爪蟾(Xenopus tropicalis)胚胎检测污染物的发育毒性

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胚胎致畸实验是检测污染物发育毒性的有效方法,用胚胎实验代替个体实验也是今后毒性检测和毒理学研究的趋势。爪蟾胚胎致畸实验(FETAX)已被广泛应用于污染物和环境样品毒性效应的检测。本论文将利用爪蟾胚胎模型,建立基于污染物作用模式的发育毒性检测方法。首先,用硫酸铜和氯化镉对热带爪蟾(Xenopus tropicalis)胚胎进行48 h暴露。结果显示,0.025~0.8 mg·L-1Cu2+和0.05~6 mg·L-1Cd2+能导致胚胎眼睛、嘴巴、肠道和尾巴等多个部位产生多种畸形,热带爪蟾对污染物的灵敏性与非洲爪蟾胚胎相当。其次,用典型的脱碘酶抑制剂碘番酸(IOP)对热带爪蟾胚胎分别进行24 h暴露。结果显示,0.5~5 mg·L-1IOP能引起爪蟾胚胎眼睛色素的减少、眼睛变形、甚至消失等现象。尽管甲状腺激素T3对热带爪蟾胚胎的发育没有影响,但T3的加入使IOP对胚胎的致畸作用增强,这表明IOP对爪蟾胚胎眼睛的致畸作用可能与甲状腺激素信号介导有关。再次,用已知的甲状腺激素干扰物四溴双酚-A(TBBPA)对热带爪蟾胚胎进行48 h的暴露。结果显示,0.01~1 mg·L-1TBBPA能引起胚胎眼睛畸形、围心腔水肿、泄殖腔拉长和尾鳍变窄等多种畸形现象。与IOP类似,加入T3能增加TBBPA对胚胎的致畸作用。最后,将热带爪蟾胚胎暴露于典型的胚胎致畸剂全反式视磺酸(RA)中48 h。结果显示,2~50μg·L-1RA能引起爪蟾胚胎眼睛畸形、脑缩小、头-尾轴蜷曲和卵黄囊吸收不完全等现象,其表型特征与IOP或TBBPA有较大差异。由此可见,新的模式动物热带爪蟾在胚胎致畸实验中可以取代非洲爪蟾,不同污染物引起的胚胎畸形特征不同,这为污染物致畸机制的解析提供了形态学依据。因此,本研究表明通过对现有FETAX实验方案的改进,可以将热带爪蟾胚胎发展为基于作用模式分析的污染物发育毒性检测模型。
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