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目的： 糖尿病持续高血糖状态下，晚期糖基化终产物（advanced glycation end products，AGEs）含量相对上升，会诱发氧化应激反应，可能参与糖尿病性白内障的发生发展。硫醇转移酶（Thioltransferase，TTase）作为巯基-二硫化物氧化还原酶家族中的成员，对晶状体氧化还原平衡状态的维持具有非常重要的作用。本实验观察AGEs对人晶状体上皮细胞氧化还原状态和TTase表达的影响，初步研究在AGEs诱导引发的氧化损伤中，TTase可能参与的作用机制，为进一步探究糖尿病性白内障的发病机制提供新思路。 方法： 1.体外培养人晶状体上皮细胞，实验组采用AGEs-BSA浓度为1.5 mg/ml，10％（v/v）胎牛血清的低糖 DMEM培养液培养；阴性对照组加入相同浓度的牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA），分别于1 d，2 d，3 d，4 d收集细胞，测定细胞内ROS含量，SOD，CAT活性，并且测定TTase活性，qRT-PCR技术检测TTase mRNA表达，Western blot检测TTase蛋白质的表达情况。 2.将前期筛选出来的转染效率较为理想的TTase siRNA转染至人晶状体上皮细胞，测定干扰效率。设立正常对照组，AGEs-BSA组，AGEs-BSA+TTase siRNA阴性对照组和AGEs-BSA+TTase siRNA干扰组，培养2d后测定细胞内ROS含量，SOD活性、CAT活性和GSSG/T-GSH。 结果： 1. AGEs-BSA处理后细胞内ROS含量随着作用时间延长逐渐增高，测得1 d，2 d，3 d，4 d ROS含量分别为：153.67±24.57，180±11.55，268.01±20.50和313.33±35.46相对荧光单位，较正常对照组明显升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。测得细胞内CAT活性于1 d，2 d，3 d，4 d时分别为10.07±0.84，9.27±0.72，7.05±0.88和5.30±1.67 U/mg protein，其中2 d，3 d，4 d较正常对照组有明显下降，差异均有统计学意义（P<0.05），SOD活性于1 d，2 d，3 d，4 d分别为104.21±3.95，92.98±8.98，86.54±3.57和81.56±5.06 U/mg protein，较正常对照组有显著性下降（P<0.05），CAT与SOD的活性均随着时间作用延长逐渐下降，BSA对照组与正常对照组无显著差异。 2. AGEs-BSA处理后晶状体上皮细胞内TTase mRNA表达水平增高，于2 d时达到峰值，约为正常对照组的5.06倍（P<0.01）。随后表达开始下降，3d时为正常对照组的3.53倍（P<0.01）。4 d时继续下降，为正常对照组的3.10倍。TTase活性1 d，2 d，3 d，4 d分别为8.03±0.86，10.82±0.51，11.05±0.83，8.63±0.77 mU/mg protein，呈先上升后下降的趋势。培养至2 d时，为正常对照组的1.53倍，于3 d时，为正常对照组的1.69倍，均有统计学意义（P<0.05）。BSA处理组TTase活性于1~4 d未见明显变化趋势。AGEs-BSA处理组3 d时TTase蛋白质的表达明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。 3. ROS含量测定结果在正常对照组、AGEs-BSA组、AGEs-BSA+TTase siRNA阴性对照组以及 AGEs-BSA+ TTase siRNA干扰组中，分别为93.33±21.85，190.30±9.84，188.02±19.31和280.32±18.35相对荧光单位，AGEs-BSA+TTase siRNA干扰组细胞内ROS含量与AGEs-BSA+TTase siRNA阴性对照组相比差异有统计学意义（P<0.05）。GSSG/T-GSH结果在正常对照组、AGEs-BSA组、AGEs-BSA+TTase siRNA阴性对照组以及 AGEs-BSA+ TTase siRNA干扰组分别为：(3.20±0.47)%，(11.35±0.62)%，(10.86±1.50)%和(16.45±0.64)%，AGEs-BSA+TTase siRNA干扰组细胞内GSSG/T-GSH最高，与AGEs-BSA+TTase siRNA阴性对照组相比有统计学意义（P<0.05）。正常对照组、AGEs-BSA组、AGEs-BSA+TTase siRNA阴性对照组以及 AGEs-BSA+TTase siRNA干扰组的 SOD活性测定结果分别为119.77±8.42，92.98±8.98，79.78±6.05和54.15±9.06 U/mg protein。CAT活性测定结果分别为15.07±0.78，9.27±0.73，9.01±1.52和4.01±0.94 U/mg protein，AGEs-BSA+TTase siRNA干扰组细胞SOD和CAT活性与AGEs-BSA+TTase siRNA阴性对照组比较显著降低（P<0.05）。 结论： AGEs影响人晶状体上皮细胞的氧化还原状态，增加ROS水平，使抗氧化酶SOD和CAT部分失活。然而在AGEs作用初期，TTase表达与活性增强，参与细胞早期的抗氧化损伤作用，其机制可能为修复SOD和CAT活性，降低GSSG/T-GSH，ROS含量，从而参与调节细胞氧化还原状态的平衡。