【摘 要】
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激光诱导荧光(LIF)具有极高的检测灵敏度,采用鞘流池、CCD及ICCD等技术可达到单 分子的极限检测水平,已成功应用于体液、微透析液、细胞乃至单细胞内痕量氨基酸、蛋白质、核
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激光诱导荧光(LIF)具有极高的检测灵敏度,采用鞘流池、CCD及ICCD等技术可达到单 分子的极限检测水平,已成功应用于体液、微透析液、细胞乃至单细胞内痕量氨基酸、蛋白质、核苷酸及神经递质等多种生理少性物质的分析.研制结构简单、成本较低的CE-LIF系统对其推广和普及具有重要的实用价值和理论意义.为此,研究人员进行了一些新的探索并取得进展,包括如下方面:1.依据体视显微镜调试系统准直,利用选择性荧光反射镜增加荧光采集率,组装了结构简单、操作简便、成本较低的CE-LIF系统,对荧光素钠的检测限可达到约50个分子的水平,和国外使用鞘流池或CCD(ICCD)的CE-LIF系统相当.2.以芘为原料经磺 化、氨化合了还原糖的高效荧光衍生试剂即8-氨基-1,3,6-三磺酸芘(APTS);建立了重结 晶和以氨水-正丙醇为展开剂的硅胶信层析纯化方法;利用NMR、MS和CE-LIF等方法对产物 结构进行了鉴定.3.考察了单糖及寡糖衍生条件,研究了单糖-APTS衍生物的CE-LIF分离条 件和检测限;成功分离了10种常见单糖的APTS衍生物,对应的检测限(S/N=3)达amol(10<-18>mole)水平;在此基础上分析了胡麻提取多糖的组成,与气相色谱的测试结果相同.4.氨 基酸的CE-LIF分离:以20种常见氨基酸为模型,系统考察缓冲液的组成、pH及多种添加剂对氨基酸-FITC衍生物分离的影响.
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