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目的：建立M-CSF核内稳定表达细胞系，探讨核内M-CSF对Cos7细胞增殖的影响，鉴定M-CSF核内相互作用靶分子。 方法：用PCR技术扩增M-CSF活性区，并插入真核表达质粒pCMV／myc／nuc，构建M-CSF核内定位重组表达质粒pCMV／nuc／M-CSF。经琼脂糖凝胶电泳、PCR、限制性酶切和测序鉴定重组子后，用脂质体分别将pCMV／nuc／M-CSF、pCMV／myc／nuc和pCMV／nuc／GFP转染Cos7细胞，经G418筛选并扩增阳性克隆后，用RT-PCR、免疫细胞化学和Western blot证实阳性克隆细胞是否稳定表达M-CSF。用细胞计数和MTT法观察核内M-CSF对细胞增殖的影响，用免疫共沉淀鉴定M-CSF的核内相互作用分子。 结果：琼脂糖凝胶电泳与限制性酶切分析显示插入质粒的片段大小与M-CSF分子大小相当，DAN测序分析表明插入质粒的M-CSF无读码框移位和突变。荧光倒置显微镜观察绿色荧光只定位于细胞核内，RT-PCR分析显示pCMV／nuc／M-CSF转染细胞表达M-CSF mRNA，免疫细胞化学与Western blot显示M-CSF准确定位于pCMV／nuc／M-CSF转染细胞核内。细胞计数显示pCMV／nuc／M-CSF转染细胞、未转染的Cos7细胞和pCMV／myc／nuc转染细胞的倍增时间分别为20.73±0.22h、28.22±0.25h和27.88±0.24h。细胞计数与MTT显示pCMV／nuc／M-CSF转染细胞的生长速率比未转染的Cos7细胞和pCMV／myc／nuc转染细胞更快。用免疫共沉淀分析表明MCM7能被抗M-CSF抗体沉淀。