血液灌流对急性中毒兔组织中百草枯浓度的影响

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目的:  本研究是建立兔子百草枯(Paraquat,PQ)急性中毒模型,并评估血液灌流(Hemoperfusion,HP)是否可有效降低兔组织中PQ浓度。  方法:  1.共60只雄性日本兔随机分为正常对照组(6只,生理盐水灌胃),空白对照组(18只,生理盐水灌胃1小时后HP治疗2小时),PQ组(18只,20%PQ溶液50mg/kg管饲),HP处理组(18只,PQ处理1小时后HP治疗2小时)?后3组分为3个观察时间组(1,3,7天),每组6只?将后3组在第1,3,7天,麻醉处死,并留取肺、肾、肝组织保存,备用。  2.观察各时间点HP对急性PQ中毒兔子行为学及解剖形态的影响。  3.建立各组织中PQ浓度的检测方法。  4.评估HP对各时间点肺肾、肝、组织中PQ浓度的影响:将200 ug兔组织加入200 ul的蒸馏水中,匀浆得到400 ul的匀浆液,取兔子组织匀浆5000 rpm/min离心5分钟,留取上清液200 ul,加入10%三氯乙酸甲醇100 ul,低温高速度离心15分钟,留取上清液20 ul。然后采用高效液相色谱仪进行各时间点各组织中PQ浓度的检测。色谱条件为:色谱柱为XBridge-C18(4.6×150 mm,5μ m);流动相:乙腈-缓冲液(5∶95),缓冲液由含0.02 mol/L磷酸二氢钠和1 mmol/L十二烷基硫酸钠组成,用磷酸调pH2.6,流速1.0 ml/min,紫外检测波长258 nm,柱温35℃。  5.观察PQ和HP对肺、肾、肝组织病理的影响,并比较病理评分。  结果:  1.正常对照组和空白对照组兔第1、3、7天行为学均未见异常表现。PQ染毒组兔于染毒后立刻出现中毒表现,3天以后逐渐开始恢复,第7天进食量和活动量明显增加。在第1、3、7天 HP治疗组行为学表现较 PQ染毒组轻,但仍对正常对照组和空白对照组严重。  2.光镜下观察:正常对照组和空白对照组在第1、3、7天兔器官组织病理切片未见明显异常表现(评分=0)。与对照组相比PQ染毒组的病理损伤明显,病理评分明显增加(P<0.05),HP治疗组第1、3、7天肺、肾、肝组织病理损害较PQ染毒组轻(P<0.05),但仍对正常对照组和空白对照组严重。  3.正常对照组和空白对照组兔子组织中未检测出百草枯,染毒组和HP治疗组中第1、3、7天的兔子肺组织中浓度最高,肝脏组织浓度最低,HP治疗组的组织浓度均低于染毒组(P<0.05)但仍对正常对照组和空白组对照组严重。  结论:  PQ可以在兔子组织中蓄积,产生病理损伤,并引起兔子行为学改变,HP可以降低兔子组织中PQ的浓度,明显减轻兔子行为学的改变,并可改善各组织病理的损伤。
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