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以急性早幼粒细胞白血病NB4细胞PML-RARa为靶基因设计相应的siRNA,并探究PML-RARαsiRNA对NB4细胞增殖和凋亡的影响,为siRNA潜在的抗急性早幼粒细胞白血病的临床应用提供理论基础和实验依据。在GeneBank上查找PML-RARa基因全序列,用MPI规则和理性设计原则对靶基因序列进行初步筛选,并对候选靶mRNA进行二级结构预测和热动力学参数分析,通过BLAST分析排除与其它基因有高度同源性的序列。筛选出来的siRNA序列和阴性对照序列分别转染NB4细胞。采用MTT比色法和软琼脂细胞克隆实验检测(?)siRNA对体外培养的NB4细胞的增殖抑制作用。用流式细胞术测定细胞凋亡,并用Giemsa-Wright染色观察细胞的凋亡形态。利用Western blot检测(?)siRNA各序列作用NB4细胞后PML-RARa融合蛋白表达水平的变化。利用各项规则筛选出了5条可能高效的PML-RARa siRNA,并委托生物公司化学合成。5条siRNA中,siRNA124、siRNA1246、siRNA1690在浓度为12.5nmol/L-50nmol/L时转染细胞24h、48h和72h后都明显的抑制NB4细胞的增殖。siRNA1244、siRNA1246、 siRNA169024h IC50分别为46.578nmol/L,59.324nmol/L,62.620nmol/L;48h IC50分别65.668nmol/L,76.549nmol/L,74.430nmol/L。软琼脂细胞集落形成实验进一步证明了siRNA对NB4细胞增殖的抑制作用。用流式细胞术检测细胞凋亡显示siRNAs(siRNA30、 siRNA382、siRNA1244、siRNA1246和siRNA1690,24h)转染NB4细胞的特异性凋亡率分别为1.53%、15.26%、64.50%、57.53%和21.46%。对NB4细胞进行Giemsa-Wright染色,在光镜下可观察到细胞皱缩、凋亡小体等。Western blot实验结果显示siRNAs (siRNA1244、siRNA1246和siRNA1690)分别转染NB4细胞后其PML-RARa融合蛋白表达下调。研究中设计的siRNAs (siRNA1244、siRNA1246和siRNA1690)在一定的浓度范围内可以有效的抑制人急性早幼粒细胞白血病NB4细胞的增殖,具有浓度依赖性；siRNAs在50nmo1/L条件下能够有效诱导人急性早幼粒细胞白血病NB4细胞明显凋亡；相应的siRNA在50nmol/L浓度下下调了NB4细胞PML-RARa融合蛋白的表达水平；筛选出siRNA1244、siRNA1246和siRNA1690这3条PML-RARa siRNA可以在蛋白水平抑制PML-RARα基因的表达,显著的抑制NB4细胞的增殖,并有效的诱导细胞凋亡。