目的:通过实验设立兔VX2骨转移瘤动物模型,观察确定适合穿刺装置穿刺活检的时间,明确适宜的穿刺时间后,通过PCNA免疫组化技术,验证自制改良穿刺装置的效果。方法:实验所应用的动物为人工养殖的家兔,第一部分所用家兔数量为25只,第二部分35只,实验所用的各种设备来自于承德医学院附属医院实验室,所用的肿瘤细胞以及试剂采购于试剂公司。1、第一部分为制造一种适合本实验的模型,观察肿瘤模型随着时间的推移而进展的各期变化,大体明确肿瘤生长需要的时间;采购VX2肿瘤细胞,植入家兔后侧肢体的胫骨近端,通过将肿瘤细胞悬液置入家兔胫骨骨孔内的方法建立模型;随机抽取5只为对照组,其余20只以双侧后肢为实验肢体,左侧肢体采用肿瘤组织悬液植入法建立兔VX2骨转移瘤模型(左侧组),右侧肢体植入生理盐水(右侧组),分别于种植后每周通过影像学及病理学检查观察肿瘤生长情况,进而明确VX2肿瘤进展各期大体时间。2、第二部分为验证自制骨肿瘤穿刺装置效果的实验,在已成熟的制造家兔VX2胫骨骨肿瘤模型以及明确髓腔内瘤体成型但尚未突破骨皮质这一阶段的时间基础上,通过PCNA免疫组化技术来验证该装置的效果;选购35只实验兔,按上述方法制造家兔VX2胫骨骨肿瘤模型,双侧后肢均植入肿瘤组织,随机选出5只,作为对照组,其余30只分为左侧组及右侧组,左侧组应用自制改良穿刺针于皮质骨上打孔后封堵,右侧组应用传统的穿刺针进行打孔(此时穿刺针于皮质上打孔的位置应与造模时植入肿瘤组织的孔相对,避免造模时形成的孔道影响实验效果),两组穿刺术完成后仔细缝合,同样层数无菌敷料包扎(3层),术后于实验后次日观察两组实验动物手术部位渗出情况,进而明确两组实验动物术后手术部位出血情况有无差异;将两组实验动物于穿刺术完成后第10天处死,获取穿刺针遗留孔周围的软组织,通过PCNA免疫组化技术查看穿刺针遗留的孔周围有无肿瘤细胞扩散,对比两种装置的效果。结果:1、第一部分制造成功家兔VX2胫骨骨肿瘤模型,通过观察影像学及病理学检查,确定植入肿瘤组织后第2周末,即第14天可见髓腔内成型瘤体,并且未侵犯皮质,左侧组植入肿瘤细胞后1~2周肿瘤组织于髓内生长,第3周开始肿瘤组织髓内生长并侵犯部分骨皮质,第4周末肿瘤组织突破骨皮质侵犯周围软组织。2、穿刺术实施后的次日见30只实验动物中,左侧组手术部位敷料可见血性渗出者1只,余下者敷料均干燥无渗出;右侧组手术部位有25只可见大量血性渗出,2只少量血性渗出,3只敷料干燥无渗出;第10天处死所有实验动物,获取穿刺针所形成的孔道周围软组织行PCNA免疫组化技术处理,左侧组即应用自制改良穿刺针组穿刺孔道周围软组织无肿瘤细胞侵及,而应用传统穿刺针组穿刺孔周围可见肿瘤细胞侵及。结论:成功地建立了一种兔VX2骨肿瘤模型,此模型可很好的应用于骨肿瘤方面各类研究的动物实验中,利用自制的穿刺装置实施穿刺术,降低了穿刺术实施后各项并发症的发生率,证明自制改良穿刺装置可以有效地应用于肿瘤组织的穿刺活检,是一种新型的有效的装置和技术。这个装置的特点为组合式的各部器械,通过穿刺针穿过骨皮质后,利用装置外侧的套管来阻断骨皮质与骨髓内的肿瘤细胞,同时使髓腔与外界形成通道,在我们获取需要的足够组织之后,通过套管将装置的关键物即封闭栓置入穿刺孔内,进而避免了骨髓腔内的肿瘤细胞通过穿刺孔扩散,并且此方法创伤较传统穿刺针无增大,但对于穿刺后各项并发症的预防却有了显著地提高。该装置可在病理检查未明确之前,尽量减少肿瘤组织的扩散,同时可减少穿刺部位的出血等并发症发生,降低血肿形成的几率,对于临床工作有很大的意义。