葡萄无核香味性状与胚挽救育种研究

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无核与香味是葡萄的两个独立的典型性状。怎样把无核与香味性状聚合,培育带有玫瑰香味的无核葡萄新品种已成为当今葡萄育种的主要目标之一。因为无核香味葡萄在鲜食、制干、酿酒等领域具有独特优势,近年来成为葡萄生产和消费的总趋势。本研究以5个无核葡萄品种为母本,6个玫瑰香味品种为父本,其中具有玫瑰香味父母本中果实香味物质通过顶空固相微萃取结合气相质谱联用技术进行测定后,配置了13个无核香味杂交组合,田间杂交后利用胚挽救技术对杂种胚珠进行离体培养。利用分子标记早期辅助选择鉴定F1代杂种株系的无核性状,主要研究结果如下:1、香味亲本的筛选:在10个鲜食葡萄的果实中共检测出80种挥发性化合物,其中决定玫瑰香味的物质主要为香叶醇和里那醇等烯萜类物质,在8个玫瑰香味品种中含量范围为0.0246~1.3824μg/g,含量最高的品种为‘沙巴珍珠’;果实中挥发性化合物含量较高的为酯类、醛类等C6化合物,该类化合物在玫瑰香味及非玫瑰香味品种果实中均普遍存在,但果实玫瑰香味主要呈香物质为萜类化合物。2、配置了无核香味杂交组合:根据香味物质测定结果,筛选香味玫瑰香味物质含量高的品种配置杂交组合13个,大田杂交后,利用胚挽救技术获得杂种株系1284个,移栽成活697株;杂交组合中母本为‘红宝石无核’及‘火焰无核’时后代成苗率较高,在以‘玫瑰香’、‘爱神玫瑰’、‘红亚历山大’为父本时胚挽救效果较好,其中胚发育率和成苗率相对最高的组合为‘红宝石无核×爱神玫瑰’,分别为48.59%和51.71%;‘红宝石无核’、‘火焰无核’适合作为胚挽救育种的母本材料,‘玫瑰香’、‘爱神玫瑰’与‘红亚历山大’适合作为父本材料。3、幼胚离体培养与成苗:研究结果证明暗培养8周时可取得较好的胚挽救结果,即大部分胚发育至鱼雷形,而接种鱼雷形和子叶形胚可保证胚发育率和成苗率较高。4、胚萌发培养基成分优化:幼胚接种至以WPM为基础培养基,添加1.0mg/L KT+0.5mg/L NAA+1.0mg/L ZT的生长调节剂时萌发率最高,为56.67%,高于对照23.34%,WPM培养基作萌发培养基时添加KT及ZT可促进根的生长发育。5、杂种幼苗无核分子标记鉴定:对其中101个株系分别利用无核基因探针GLSP1-569与无核分子标记SCF27-2000、SCC8-1018进行无核性状检测,有27个株系使用不同的标记均检测到特异性条带,初步确定以上携带无核特异条带的为无核株系。综上,无核香味葡萄胚挽救育种共获得杂种株系697株,对其中101个株系进行无核分子标记鉴定,得到27个株系能在不同引物中均扩增出特异性条带;筛选出适宜用作母本的品种有‘红宝石无核’、‘火焰无核’,结合亲本香味物质测定结果适合用作香味胚挽救育种父本的有‘爱神玫瑰’、‘亚历山大’、‘玫瑰香’;得到优化的胚萌发培养基:WPM+1.0mg/L KT+0.5mg/L NAA+1.0mg/L ZT。
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