野牛草(Buchloe dactyloides (Nutt.))为暖季型禾本科草坪草,自上世纪50年代引入我国,种植历史已近60年。在诸多的草坪草种中,野牛草以其突出的抗旱、抗寒、抗病等特性,历经日益恶化的气候条件。特别是在我国的东北、西北、华北地区,野牛草表现出草坪管护耗水量低、用肥量低、生长缓慢、修剪次数少等优良的坪用特性。但野牛草种子休眠性较强,影响直播草坪的成坪质量和植物种的大面积推广。因此,深入开展该植物种子破眠机理的研究,对丰富草业科学研究内容以及指导生产实践都具有一定的意义。本研究以我国自主选育的“中坪一号”野牛草种子为实验材料,对其休眠原因和破眠方法进行了研究。在此基础上,应用蛋白质双向电泳技术与质谱分析,鉴定野牛草种子破眠差异表达蛋白,从蛋白质水平阐述野牛草种子破眠机理。具体研究结果如下:1野牛草种子较小,平均长度1.75mm;宽度1.01mm;千粒重为2.0g。2～5粒种子着生于聚合生长的颖苞内。颖片间因难以接合而形成孔道和腔道。这些孔道和腔道是野牛草种子通气透水的门户。2电镜及能谱观测结果表明,颖苞表面光亮;结构致密;质地坚硬,并镶嵌有富硅鳞片状类晶物体,硅元素含量高达26.92%。且富硅鳞片状类晶物体脱落疤痕处无颖孔,同结缕草颖苞结构不同。3通过2006年去颖苞种子和种球发芽率间的极显著差异;种球内未发芽种子较高的生活力(80%以上);未突破种皮的胚根生长方向;颖苞表面结构与成分;不同贮藏时间内野牛草种子发芽率的极显著差异:以及赤霉素(GA3)对休眠性最强的2008年种子引发效果(发芽率提高到85.33%)等方面,充分证明了野牛草种子属内源性休眠占主导地位的综合休眠类型。4野牛草种子破眠方法的选择,需综合考虑野牛草种子休眠种类、贮藏时间、破眠后种子发芽效果等因素。贮藏时间超过2年的野牛草种子,采用机械破眠法剥除颖苞,可使种子发芽率达到80%以上;贮藏时间不足1年或2年以下的野牛草种子,需采用机械破眠与生理性破眠相结合的方法,使种子发芽率达到80%以上,赤霉素引发浓度以60mg/Kg为宜。5使用TRIZOL沉淀蛋白; pH4-7 IPG胶条;合理的聚焦程序,能得到高分辨率,重复性好的蛋白质2-DE图谱。银染后软件分析,可以检测到800个以上蛋白点。6以2008年去离子水浸泡的种子为对照,去离子水浸泡的2006年种子和外源激素浸泡的2008年种子为处理,进行野牛草种子破眠差异蛋白质组学研究。2-DE图谱分析结果表明,所有处理和对照中,共检测到34个蛋白丰度差异表达变化在2倍以上的蛋白点。对其中的20个蛋白点进行了MALDI-TOF-MS分析,有16个蛋白点得到了有效鉴定,通过功能分析,表明这些蛋白主要参与到了能量代谢和电子传递,光合作用,转录调控,信号传导以及蛋白质合成和生长发育等过程。