氟对斑马鱼鱼鳃渗透调节影响的研究

来源 :山西农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:xdz429
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为了研究氟对斑马鱼鱼鳃组织结构及渗透调节的影响,将成年斑马鱼随机分成4组进行水氟暴露试验,每组各设1个重复,氟离子浓度分别为0mg/L、20mg/L、40mg/L和80 mg/L。在染毒30 d和60 d后进行随机采样,测量鱼的体长、体重,并对鱼鳃组织进行石蜡切片观察其病理变化;分别运用超微量ATP酶活测试盒和实时荧光定量PCR方法检测鱼鳃组织中渗透调节相关酶活性及基因水平的变化。试验结果显示:1.斑马鱼体长体重结果显示,氟暴露30 d和60 d后,随着氟浓度的升高,斑马鱼体长及体重都出现了明显的下降趋势,但同一浓度组不同时间内的变化不明显。2.鱼鳃组织病理切片结果显示,氟暴露30 d和60 d后,鱼鳃组织发生明显的病变,如鳃丝前端水肿,鳃小片细胞肿胀、脱落,基部黏连,80 mg/L氟组鳃损伤严重,鳃小片中间充满黏液并且部分完全融合呈扇形。3.酶活性测定结果显示,氟暴露30 d和60 d后,鳃组织细胞中Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性随着氟浓度的增加而下降,20 mg/L浓度组酶活性下降的不明显,而40mg/L和80mg/L氟浓度组酶活性显著下降。并且在同一氟浓度组中,随时间的推移,酶活也呈下降趋势。4.实时荧光定量PCR检测结果显示,在氟暴露30 d后,AQP3、NKA和NHE基因的表达都呈现出先下降后上升的趋势,其中AQP3基因的表达在40 mg/L组和80 mg/L组都显著高于对照组;NKA基因表达在40mg/L最低,显著低于对照组,其它组没有显著性差异;NHE基因则表现为80 mg/L组极显著高于对照组,其它两组没有显著性差异;CFTR基因的表达呈先上升后下降的趋势,在40 mg/L组显著高于对照组,其它两组没有显著性差异。氟暴露60 d后,发现CFTR和NHE基因都呈现下降趋势,且40 mg/L组和80mg/L组都存在极显著性差异;AQP3和NKA基因则表现为先下降后上升的趋势,AQP3基因的表达在20 mg/L组时最低,差异性不显著,80 mg/L组表达最高,差异性显著;NKA基因则在40mg/L和80mg/L组均极显著性高于对照组。以上结果表明,氟可通过影响斑马鱼渗透相关酶和基因表达而造成鱼鳃结构和功能的紊乱,且随着氟浓度的升高,影响加重,揭示氟对鱼类等水生生物确实存在毒害作用。
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