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目的1.探讨干燥综合征(Sjgren’s syndrome,SS)患者血清中白介素17A(Interleukin 17,IL-17A)的表达及IL-17A与SS中医症候和实验室指标的相关性。2.建立SS模型小鼠,研究解毒化瘀中药对SS模型小鼠颌下腺组织及外周血辅助性T细胞17(T helper cells,17)细胞和调节性T细胞(Regulatory T cells,Treg)的影响,探讨Th17/Treg免疫平衡在SS发病机制中的作用及解毒化瘀药的调控机制。方法1.选取SS患者60例作为实验组,同期选取健康者30例作为阴性对照组。采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)法检测SS患者血清IL-17A的表达,观察IL-17A与SS患者主要症状及实验室指标的相关性。2.将90只C57b1/6j小鼠随机分成为A、B、C、D、E、F6组,每组15只,采用免疫诱导法建立SS小鼠动物模型,从造模第4周开始分别予润燥灵汤高、中、低剂量和醋酸泼尼松混悬液灌胃给药,连续用药4周后眼球取血采集血液,处死小鼠,计算颌下腺及免疫器官指数,取颌下腺、胸腺、脾、肺及肾脏制作病理切片,行HE染色。ELISA法检测血清IL-17A的表达,逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测小鼠颌下腺组织视黄醇类核内受体(Retinoid related orphan receptor gammat,ROR γ t)和转录因子叉头框蛋白3(forkhead box Protein 3,FOXP3)FoxP3的表达,流式细胞仪检测Th17细胞和CD4+ CD25+T细胞的含量。结果1.临床研究(1)SS患者外周血清中IL-17A含量明显高于阴性对照组(P<0.05)。(2)SS患者血清中IL-17A的表达与免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)、免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)水平呈正相关性(P<0.05)。(3)抗SSA抗体阳性的SS患者血清中IL-17A的表达明显高于抗SSA抗体阴性的SS患者(P<0.05);抗ANA抗体强阳性的SS患者血清中IL-17A的表达明显高于抗ANA抗体低滴度阳性的SS患者(P<0.05)。(4)有猖厥齿与关节痛临床表现的SS患者血清中IL-17A的表达明显高于无猖獗齿与关节痛的SS患者(P<0.05)。2.动物实验(1)病理切片结果:醋酸泼尼松及润燥灵高剂量均对颌下腺、胸腺、脾、肺、肾脏具有治疗作用。(2)颌下腺测定指数结果显示:醋酸泼尼松组、润燥灵高、中剂量组小鼠颌下腺指数比模型组小鼠颌下腺指数均有不同程度增大(P<0.05);润燥灵低剂量组小鼠颌下腺指数与模型对照组小鼠颌颌腺无显著差异(P>0.05)。(3)ELISA检测结果显示:模型对照组小鼠及各用药组小鼠血清中IL-17A含量比空白对照组小鼠血清中IL-17A含量有不同程度升高(P<0.05);各用药组小鼠血清中IL-17A含量比模型对照组小鼠血清中IL-17A含量均有不同程度下降(P<0.05)。(4)RT-PCR分析结果:RORγt mRNA相对定量表达模型对照组、各用药组与空白对照组比较,均有不同程度升高(P<0.05);各用药组与模型对照组比较,均有不同程度下降(P<0.05);润燥灵各剂量组均高于醋酸泼尼松组(P<0.05)。FoxP3mRNA相对定量各用药组与空白对照组比较,均有不同程度升高,模型对照组较空白对照组有所下降,均具有有统计学意义(P<0.05);各用药组与模型对照组比较,FoxP3 mRNA相对定量均有不同程度升高(P<0.05)。(5)流式细胞仪检测结果显示:模型对照组、润燥灵中、低剂量组小鼠CD4+T/CD4+CD25+T较空白对照组明显增高,醋酸泼尼松组及润燥灵高剂量组小鼠CD4+T/CD4+CD25+T较空白对照组明显降低(P<0.05)。结论1.IL-17A于SS患者外周血中高表达,与IgG、IgM升高及抗SSA抗体、抗ANA抗体的表达具有一定的相关性。2.SS患者IL-17A表达升高,可能会导致猖獗齿与关节痛。3.润燥灵在治疗SS作用机制方面不仅能够通过减少IL-17A分泌,刺激Tre g细胞增殖,抑制Th17细胞,从而达到调节Th17/Treg平衡的作用,而且还能够有效的治疗因自身免疫紊乱导致颌下腺、胸腺、脾脏、肺脏及肾脏的损伤。