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核黄素由植物、微生物产生。它在生物体内形成黄素单核苷酸FMN及黄素腺嘌呤二核苷酸FAD,FMN和FAD作为黄素酶的辅酶,参与机体组织呼吸链电子传递及氧化还原反应,参与植物抗氧化及过氧化过程,从而影响氧化性损伤及后续过敏反应过程中活性氧中间体(ROIs)的产生。ROIs是过敏细胞坏死的重要信号,能调节生长、抗病、抗虫、抗逆,所以核黄素与植物免疫反应有关。对多种植物体外施用核黄素的研究结果表明,核黄素具有促进生长、提高作物产量、增强植物抗逆能力的功效,并且能够诱导植物对多种病害的抗性,启动不同于其它已知的抗病信号通路,起到了多效性植物生长调节剂的作用。植物中的核黄素水平很可能对抗病防卫和生长发育过程有影响。因此,内源核黄素含量的变化可能对一些生理生化过程产生影响。我们以此为切入点研究核黄素参与的植物防卫和生长调控的交叉点。 使用化学激发子水杨酸、茉莉酸甲酯、乙烯前体氨基环丙烷羧酸及生物激发子harpinEa和elicitin处理拟南芥时,可以诱导LS基因表达与核黄素合成。LS基因表达水平与核黄素含量的明显提高拟南芥对DC3000的抗病性。 本实验室还从中华鳖中克隆核黄素受体基因(RfBP),成功转化拟南芥获得了转基因植株。根据核黄素受体对动物体内核黄素浓度的调节作用,很可能这个远源的基因也能在植物体当中起作用,调节植物内源核黄素的含量,为进一步研究核黄素在植物生长和防卫中所起的作用提供了很好的基础。 本研究所使用的是上述转基因拟南芥,研究结果表明转基因拟南芥植株因导入外源的基因促使内源核黄素总含量的升高,总量的升高与受体基因的表达量呈现正相关;与野生型相比,转基因植株的根的生长加快、个体较大、生长良好;在不同时期的跟踪观察,采样秤重结果均表明,内源核黄素含量的升高可以促进植物根的生长,增加植物鲜重。从分子水平鉴定与生长相关基因的表达进一步证实这一结果。 对转基因和野生型拟南芥接种丁香假单胞番茄致病变种Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000,接种后的0、1、2、3、4、5天从接种的植物组织中回收细菌,扩增与抗病信号通路相关的基因。结果显示:转基因拟南芥植株体内的细菌增长较野生型拟南芥缓慢,前者较后者发病症状减轻;与抗病防卫相关基因的表达,前者较后者提前并且有不同程度的加强。 综上结果表明内源核黄素含量的升高有助于加强拟南芥的生长,提高拟南芥对叶