茶树离体再生体系与微型嫁接的研究

被引量 : 4次 | 上传用户:chenming88623
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
茶树(Camellia sinensis)是世界上最重要的生产非酒精类饮料的木本植物之一。它生长周期长,自然结实率和杂交结实率都较低,使得常规茶树育种需要20-25年[1]。植物组织培养技术是加快优质品种创新的重要手段,是现代生物技术应用于遗传育种研究的基础。为建立快速、高效的茶树离体再生体系,本研究分别以茶树平阳特早[C. sinensis cv.pingyangtezao]7月下旬枝条和茶树舒茶早[C. sinensis cv. shuchazao]10月中旬的种子子叶为外植体,在离体培养条件下,首先建立了茶树子叶离体再生体系,比较了其器官发生途径和体细胞胚发生途径;其次建立了茶树腋芽离体快繁体系;第三采用微型嫁接的方式,解决了茶树组培苗生根难,耗时长的问题,为茶树组织培养与工业化生产的连接提供技术参考。主要结论如下:1.茶树子叶离体再生的器官发生途径不带胚子叶愈伤组织的诱导率随着2,4-D浓度的升高而增加,细胞分裂素配合生长素使用对愈伤组织的产生有增效作用。在培养基MS+2.0mg L-12,4-D+0.5mg L-1 KT中,岀愈时间最短,岀愈率最高,达83.6%。转到芽诱导培养基MS+2.0mg L-16-BA+0.2mg L-1 NAA中继代培养,带胚子叶的出芽率、芽增殖倍数以及体细胞胚发生率分别为36.5%、12.3和38.2%,均高于不带胚子叶。2.茶树子叶离体再生的体细胞胚发生途径在培养基MS+2.0mg L-16-BA+0.2mg L-1 NAA+1.0mg L-1 GA3中,带胚子叶和不带胚子叶可迅速脱分化产生胚性愈伤组织,进而产生体细胞胚和次级体细胞胚,并萌发出芽。带胚子叶的体细胞胚发生率为85.7%,体细胞胚萌发率79.4%,芽增殖倍数为17.0,均高于不带胚子叶。3.茶树腋芽离体快繁体系的建立以腋芽为外植体,在MS+2.0mg L-16-BA+0.2mg L-1 NAA培养基中腋芽迅速萌发,培养60d,成苗率可达82.3%。将得到的小苗按枝条、去顶芽和部分叶片的枝条、腋芽带茎和部分叶柄三种处理接种于1/2MS+1.0mg L-16-BA+0.1mg L-1 NAA培养基中,腋芽带茎和部分叶柄的处理萌发率和增殖倍数最高,分别达到71.4%和5.5;去顶芽和部分叶片的处理生长的最健壮;整个枝条的处理在部分茎段底端出现体细胞胚。4.胚性愈伤组织的继代培养继代培养中,体细胞胚的发生、萌发以及次级胚性愈伤组织的产生同时进行。胚性愈伤组织的体细胞胚萌发率在M(MS不添加任何激素)培养基中最高,为58.3%,在P(MS+2.0mg L-16-BA+0.2mg L-1N AA+1.0mg L-1 GA3)中最低;而次级体细胞胚发生率以及体细胞胚增殖倍数在后者中最高。5.茶树体细胞胚的发生茶树体细胞胚在子叶柄处直接发生,或在子叶处产生胚性愈伤组织间接发生。带胚子叶以直接和间接两种方式产生体细胞胚,而不带胚子叶只以间接方式产生。在体细胞胚间接发生途径中,子叶表面隆起是发生脱分化的标志,随后细胞团膨大、颜色变绿转化成胚性愈伤组织,其表面长出半透明的颗粒状突起即为体细胞胚。体细胞胚的石蜡切片表明,此处细胞小且排列紧密,细胞质浓,有若干个分生区域,具有分生能力。6.组培苗的微型嫁接选取生长健壮的茶树组培苗,剪取1.5-3cm长作为接穗。茶树种子苗长至一芽二叶,离基部3-5cm剪去嫩梢作为砧木。采用劈接法嫁接,将接穗切口处浸入200mg L-1的2,4-D溶液中3-5min,嫁接于砧木上胚轴处,用石蜡膜固定。20d后成活率为64%。
其他文献
新闻事业是社会上层建筑的组成部分,具有意识形态属性,这就决定了它必然与政治有着千丝万缕的联系,任何时期我们都要坚持“政治家办报”。“政治家办报”的概念最早是由毛泽
目的观察脑室外引流术在脑室出血治疗中的应用效果。方法对我院2011年1月-2012年5月间收治的165例脑室出血血肿破入脑室患者,分别采用单纯脑室外引流、脑室引流+溶凝疗法、开
大功率直流变换器是电力电子领域的重要组成部分,为了减小变换器的体积,降低功率器件的开关损耗,提高整机的效率,软开关技术对提高电力电子装置的频率和功率密度起着至关重要的作
科学地进行城市抗震防灾规划是非常必要的。根据我国城市抗震防灾的特点,编制了城市抗震防灾规划管理辅助决策信息系统,提出了系统的设计思想、体系结构和功能结构。系统采用面
“如果我去看病,除了便捷,我希望患者不用去选医生,而把医生作为一个整体,都作为治病救人的白衣天使来看,就不会有那些失望、愤怒引发的医患矛盾。就像我们儿时看病一样,你也不认识
随着计算机网络和现代通信技术的不断发展,家庭智能化已经越来越受到人们的青睐。智能家居是信息时代带给人们的一个高科技产物,是人们追求高质量生活状态的一个必然要求,智
休闲活动是一种城市居民活动,城市绿地休闲空间是承载这种行为的一种空间。作为城市生态休闲的空间载体,良好的生态休闲环境不仅是生态休闲发展到一定阶段的必然产物,也是城
信息化人力资源是医院信息化建设的第一资源,随着新一轮"医改"的启动,医院信息化人力资源管理凸显薄弱。为改善现状,实现医院信息化人力资源管理建设目标,本文从如何建设信息化
奥地利著名作曲家舒伯特(Franz Schubert,1797-1828),在其短暂的一生中创作了600多首艺术歌曲。作为浪漫主义与艺术歌曲的奠基人,他将艺术歌曲这一形式最终定型,并赋予新的艺
改革开放的深入发展带动我国经济社会进入了转型时期,利益主体和利益需求呈现出多元化的特点,共同存在于同一场域的多元利益主体共同争夺着有限的资源,使得利益冲突越来越明显。