论文部分内容阅读
目的: 近视是目前最常见的屈光不正,中国青少年的近视率已达到了90%,严重情况下,近视导致的眼球变形的伸展和眼内部结构的变薄,增加了视网膜脱离、白内障、青光眼甚至失明的风险,成为不容小觑的公共卫生问题。多巴胺作为眼中重要的神经递质,在屈光发育过程中起着重要的调控作用。不少研究表明多巴胺 D1受体和D2受体参与近视的发生发展,但其具体作用部位、机制仍未明了。本研究主要采用组织特异性敲除小鼠动物模型来探究多巴胺D1受体(DRD1)和多巴胺D2受体(DRD2)在近视发生发展中的作用部位,进一步阐明近视发生的机制。 方法: Drd1flox/flox(D1f/f)小鼠和Drd2flox/flox(D2f/f)小鼠分别与Six3-Cre杂交,繁殖出所需要的视网膜特异性DRD1敲除小鼠:实验组D1f/f Cre+小鼠,对照组D1f/f Cre-小鼠;视网膜特异性DRD2敲除小鼠:实验组D2f/f Cre+小鼠,对照组D2f/f Cre-小鼠。与 S100a4-Cre杂交,繁殖出所需要的成纤维细胞特异性 DRD1敲除小鼠:实验组D1f/f Cre+小鼠,对照组D1f/f Cre-小鼠;成纤维细胞特异性DRD2敲除小鼠:实验组D2f/f Cre+小鼠,对照组D2f/f Cre-小鼠。实验分别在正常视觉环境和形觉剥夺(FD)条件下进行。正常视觉环境下的小鼠在出生后第4、6、8周利用ERI、OCT测量小鼠的屈光、眼轴等眼球生物学参数,在出生后第5周利用Micro IV进行眼底拍照,第7周检测其ERG,第8周ERI、OCT测量结束后取小鼠视网膜、角膜、晶体、巩膜检测DRD1/DRD2的表达量。形觉剥夺条件下的小鼠在出生后第4周给予右眼形觉剥夺2周或者4周处理。 结果: 1.视网膜DRD1敲除小鼠的视网膜DRD1表达量明显降低,敲除效率为94.3%,屈光向远视方向偏移,眼底无明显变化,明适应和暗适应下ERG的a波、b波振幅均显著降低。2.视网膜DRD2敲除小鼠的视网膜DRD2表达量明显降低,敲除效率为93.6%,屈光向远视方向偏移,眼底、ERG均无明显变化,对FDM无明显影响。3.成纤维细胞DRD2敲除小鼠的巩膜、晶体DRD2表达量均降低,巩膜敲除效率为60.5%,晶体敲除效率为39.5%,屈光向近视方向偏移,对FDM无明显影响。 结论: 1.Six-Cre小鼠的屈光发育正常,Cre重组酶的表达不影响小鼠的正常屈光发育;2.视网膜多巴胺D1受体是正视化的必要条件,D1受体缺失引发远视;3.视网膜多巴胺 D2受体是正视化的必要条件,D2受体缺失引发远视;4.巩膜、晶体多巴胺D2受体是正视化的必要条件,D2受体缺失引发近视。