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目的:通过观察抗支糖浆对肺炎支原体感染大鼠TLR4以及Th1/Th2相关细胞因子的影响,进而探讨抗支糖浆对其免疫机制的调控作用,为进一步深入研究及临床推广应用提供依据。方法:SPF级雄性Wistar大鼠,120只,体重200±15g,采用随机数字表法分为4组:空白对照组、模型对照组、抗支糖浆组、阿奇霉素组,每组30只,空白对照组与各接种组分房饲养,适应性饲养1周后开始实验。接种方法:除空白对照组外其余各组连续4天,每天接种106 CCU/ml的MP菌液1 00ul;空白对照组给予等量不含MP的培养液。药物干预方法:各组末次接种后转日开始给药,抗支糖浆组按6g/kg体重给予灌胃,给药体积设为1ml/100g;阿奇霉素组采用5日给药法,首日给予阿奇霉素45mg/kg,后4日给予阿奇霉素22.5mg/kg。空白对照组和模型对照组分别给予等量生理盐水灌胃。各组均每日给药1次,连续10日。取材:各组实验动物分别在首次给药后1、3、5、8、10天(将其定义为观察期)分批次取材,每组随机取6只大鼠,通过HE染色、ELISA、Western blot和Real-time PCR等技术,从组织学水平、细胞学水平以及分子学水平,分别观察抗支糖浆对MP动物模型肺组织病理变化,细胞因子、炎症介质的变化,以及相关因子的蛋白及基因表达产生的影响。结果:1.BALF中MP的检测:模型对照组在观察期第1天,大鼠BALF中便可检测到MP;与模型对照组比较,在观察期第3天、5天、8天、10天,抗支糖浆组、阿奇霉素组BALF中MP明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);抗支糖浆组与阿奇霉素组比较,在整个观察期内,无显著性差异(P>0.05)。2.肺组织HE染色:模型对照组在观察期的第1天即可见炎症反应,第3天最重,镜下可见支气管管壁破坏、粘膜充血水肿;支气管周围、粘膜层和血管周围有较多炎性细胞,部分肺泡壁变薄或断裂,肺泡间隔增宽,周围大量炎性细胞浸润;与模型对照组比较,抗支糖浆组、阿奇霉素组炎症反应明显减轻。3.肺组织病理学评分:模型对照组在观察期的第1天即出现炎症反应,于第3天病理学评分达到峰值;与模型对照组比较,在观察期第3天、5天、8天、10天,抗支糖浆组、阿奇霉素组病理学评分均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);抗支糖浆组与阿奇霉素组比较,在整个观察期内,病理学评分无显著性差异(P>0.05)。4.ELISA检测显示:4.1血清中ELISA检测结果显示:与空白对照组比较,模型对照组血清中TLR4、MyD88、NF-κB的含量明显升高(P<0.05);与模型对照组比较,在观察期第3天、5天、8天、10天抗支糖浆组、阿奇霉素组TLR4、MyD88、NF-κB的含量明显降低(P<0.05);抗支糖浆组、阿奇霉素组之间比较,在整个观察期内TLR4、MyD88、NF-κB的含量,无显著性差异(P>0.05)。4.2 BALF中ELISA检测结果显示:与空白对照组比较,模型对照组BALF中IL-6、TNF-α的含量明显升高,BALF中IL-2的含量明显降低(P<0.05);与模型对照组比较,在观察期第3天、5天、8天、10天抗支糖浆组、阿奇霉素组BALF中IL-6、TNF-α的含量明显降低,IL-2的含量明显升高(P<0.05);抗支糖浆组、阿奇霉素组之间比较,在整个观察期内IL-6、TNF-α、IL-2的含量无显著性差异(P>0.05)。5.Western Blot检测结果显示:与空白对照组比较,模型对照组肺组织中IFN-y蛋白表达明显减少,IL-4蛋白表达明显增多(P<0.05);与模型对照组比较,在观察期第3天、5天、8天、1 0天抗支糖浆组、阿奇霉素组IFN-γ蛋白表达明显增多,IL-4蛋白表达明显减少(P<0.05):抗支糖浆组、阿奇霉素组之间比较,在整个观察期内,无显著性差异(P>0.05)。6.Real-time PCR检测结果显示:与空白对照组比较,模型对照组肺组织中IFN-ymRNA表达明显减少,IL-4mRNA表达明显增多(P<0.05);与模型组比较,在观察期第3天、5天、8天、10天抗支糖浆组、阿奇霉素组IFN-γmRNA表达明显增多,IL-4mRNA表达明显减少(P<0.05);抗支糖浆组、阿奇霉素组之间比较,在整个观察期内,无显著性差异(P>0.05)。结论:1.抗支糖浆可以有效改善MP感染大鼠的一般状况,对肺组织的炎症反应有明显抑制作用。2.抗支糖浆可以降低MP感染大鼠血清中TLR4、MyD88、NF-κB的含量,从而减轻MPP的炎症反应。由此认为TLR4-NF-κB可以作为评估支原体感染的一个理想切入点,部分减弱TLR4-NF-KB的转导有望成为研究治疗MPP的新靶点。3.抗支糖浆可以降低MP感染大鼠BALF中IL-6、TNF-α的含量,升高MP感染大鼠BALF中IL-2的含量,从而抑制MPP炎症反应。4.抗支糖浆可以通过上调IFN-γ基因和蛋白的表达,下调IL-4基因和蛋白的表达,进而调控机体Th1/Th2的平衡,从而起到抑制MPP炎症,保护肺组织的作用,阐释了抗支糖浆治疗肺炎支原体肺炎的机理可能与调节机体免疫平衡相关。