论文部分内容阅读
从吉林省通化市山区的土壤中分离得到一株好氧性纤维素降解细菌。并对其形态学特征、生理生化特性及部分长度的16SrDNA序列进行了研究，研究结果显示，该细菌是一株新的纤维素降解菌株，命名为sp.DS-0501。
本文通过滤纸纤维素平板和纤维素双层平板结合分离得到该菌株，结果表明该菌株可有效的降解纤维素滤纸。31℃培养3d，纤维素滤纸平板上可出现黄色菌落：培养6d，纤维素滤纸可被完全降解。
将该菌株分别接种到五种不同的液体培养基中，培养96h后测定其纤维素酶活力，确定了最佳初始产酶液体培养基，即：Mandel盐营养液+1％滤纸片。
以初始产酶液体培养基为基础，对该菌株进行最佳产纤维素酶的条件进行优化，结果表明最佳产酶条件为：初始pH值为7.0；接种量为5％；培养温度为30～32℃；摇床转数为140r/min时，为最佳产酶条件。即利用液体培养基：Mandel盐+1％滤纸片在上述条件下培养96h,产酶活力最高。
对该粗酶液CMCase的特性进行了研究，结果表明发酵上清液、菌体悬浮液和菌体破碎液的酶活力分别是：25.68U/mL、8.44U/mL、7.54U/mL，进一步说明该菌株产生的CMCase是胞外酶，FPAase大多存在于胞内，少部分分泌到胞外。
将粗酶液进行了超滤、盐析、透析、SephadexG-100凝胶层析和冷冻干燥，得到了粗酶粉末，对粗酶的性质研究表明，CMC酶的最适反应温度为50℃，FPA的最适反应温度为40℃：CMC酶与FPA酶活最适反应pH均为5.0；在温度40℃-50℃，pH4.0-5.0条件下较稳定。
由于菌株DS-0501生长过程中产生的荚膜较粘，粗酶干粉中有较高含量的多糖，因此酶的纯化比较困难，有待于进一步研究新的纯化方法。