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目的:探讨氧化苦参碱对高脂喂养所致胰岛素抵抗大鼠肾脏纤维化的影响及其发生机制。方法:对48只8周龄清洁级健康的雄性SD大鼠(180-220g)进行适应性喂养1周后,随机分为2组:正常对照组(Con)12只和高脂饮食组(HF)36只。用普通饲料喂养Con组,高脂饲料喂养HF组。喂养8周后各组随机抽取6只大鼠,进行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验,留取血液及肾脏组织标本。计算葡萄糖输注率(GIR),判定造模成功后,Con组剩余6只不变,将剩余HF组大鼠随机分为5组:高脂模型组(HF)、氧化苦参碱低剂量组(OMT-L)、氧化苦参碱中剂量组(OMT-M)、氧化苦参碱高剂量组(OMT-H)及吡格列酮组(Pio),继续喂养各组大鼠并分别给予相应药物干预10周。药物干预10周后,处死大鼠,留取血清及肾脏标本,测空腹血糖FBG、空腹血胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、糖化血红蛋白(Hb A1c),应用Western Blot检测肾脏组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)及组织金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)的蛋白表达水平,ELISA试剂盒测肾组织Ⅳ型胶原蛋白水平,HE染色、电镜观察肾脏形态变化。结果:1高脂喂养8周后,各项指标变化:(1)体重及摄食量:两组大鼠喂养8周后,HF组大鼠体重明显高于Con组(P<0.05),但两组间每日平均摄入热量无统计学差异(P>0.05)。(2)血清生化指标:与Con组相比,HF组大鼠FBG、FINS、BUN、Cr、TC、TG、Hb A1c均显著提高,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)Ⅳ型胶原蛋白含量:与Con组相比,HF组大鼠肾脏组织中Ⅳ型胶原蛋白含量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验:HF组大鼠的葡萄糖输注率明显低于Con组,差异有统计学意义(P<0.05)。2药物干预10周后,6组大鼠各项指标变化:(1)体重及摄食量:药物干预10周后,HF组大鼠体重明显高于正常对照组(P<0.05),OMT各组及Pio组的大鼠体重较高脂组减轻,差异有统计学意义(P<0.05),较Con组仍偏高,差异有统计学意义(P<0.05)。HF组大鼠每日平均摄食量较Con组明显升高,而OMT各组及Pio组较正常对照组仍偏高,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)血清生化指标:与Con组相比,HF组大鼠FBG、BUN、Cr、TG、TC、Hb A1c均显著提高,差异均有统计学意义(P<0.05)。OMT各干预组及Pio组各项指标较正常组高,差异有统计学意义(P<0.05),较HF组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)Ⅳ型胶原蛋白:与Con组相比,HF组大鼠肾脏组织Ⅳ型胶原蛋白含量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。OMT各干预组及Pio干预组较正常组高,差异有统计学意义(P<0.05),较HF组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)肾脏HE染色:经光镜高倍镜(×400)观察两组大鼠肾组织切片可见,Con组肾小球及肾小管清晰可见,结构正常。HF组出现了明显的肾脏损害,HF组肾小管肿胀,细胞增生,肾小球体积缩小,基底膜增厚,系膜基质增多,硬化明显。OMT及Pio组的上述异常明显改善。(5)透射电镜观察肾组织:经过10周药物干预后,通过透射电子显微镜观察各组大鼠肾组织,发现Con组肾小球结构基本正常,足细胞足突排列整齐有规则。HF组可见肾小球足细胞足突结构紊乱,广泛融合甚至消失,细胞外基质增多,基底膜明显增厚且厚度不均。OMT及Pio组肾小球足细胞足突结构仍不正常,但足突融合情况较HF组明显减轻,细胞外基质减少,但仍未恢复至Con组的状态。(6)肾脏纤维化指标:与Con组相比,HF组TGF-β1、TIMP-2的蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),MMP-2的蛋白表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.05);OMT各干预组及Pio干预组较HF组的TGF-β1、TIMP-2的蛋白表达下降,而MMP-2的表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1高脂饮食成功诱导了胰岛素抵抗大鼠的模型,表现为高胰岛素血症、高血脂、高血糖与胰岛素抵抗。2氧化苦参碱可以改善糖代谢、脂代谢紊乱,减轻肾脏纤维化,改善肾脏功能。3氧化苦参碱可能是通过下调TGF-β1、TIMP-2,上调MMP-2来减轻肾脏纤维化。