白藜芦醇对淋巴瘤细胞的抑制作用及对促凋亡蛋白caspase-3影响的研究

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白藜芦醇对淋巴瘤细胞的抑制作用及对促凋亡蛋白caspase-3影响的研究目的:最常见的眼眶淋巴瘤细胞的来源几乎都是B细胞,而BJAB细胞也是来源于B细胞。因此,选择BJAB细胞作为研究对象,探讨白藜芦醇它的抑制作用,以及对促凋亡蛋白caspase-3影响,进而研究白藜芦醇对眼附属器结外边缘区B细胞淋巴瘤(extranodal marginal zone B cell lymphoma of mucosa-associated lymphoidtissue,MALT)的作用和相关机制。方法:1、首先复苏BJAB细胞。细胞稳定后培养并观察生长状况,了解细胞的生物学特性。2、实验分为白藜芦醇药物组(浓度分别为25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)、阿霉素阳性对照组(浓度为40μmol/L)及空白对照组,分别作用于BJAB细胞,在24、48、72h时观察细胞的形态变化,采用CCK-8法检测不同组别的BJAB细胞增殖的抑制率,从而观察各组不同浓度的药物在不同时间对BJAB细胞增殖的抑制作用。3、采用western blot检测各组细胞caspase-3(半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3)蛋白的表达情况,分析不同浓度的药物在不同时间对BJAB细胞凋亡的影响。结果:1、复苏的BJAB细胞密度中等,形态正常。胞体呈圆形或类圆形,细胞核圆,生长状态良好。2、不同药物浓度的白藜芦醇药物组和阿霉素阳性对照组作用于BJAB细胞24、48、72h,均可以不同程度地抑制细胞增殖,cck-8法检测的OD值均低于空白对照组,经统计分析,差距具有统计学意义(P<0.05)。3、western blot检测结果显示,与空白对照组相比,不同药物浓度的白藜芦醇药物组和阿霉素阳性对照组作用于BJAB细胞24、48、72h,caspase-3蛋白的表达均有不同程度的升高。结论:1、白藜芦醇对BJAB细胞的增殖具有一定的抑制作用,浓度和时间均可以影响细胞增殖,其中时间依赖性作用明显。当白藜芦醇浓度为100μmol/L时,呈现时间依赖性,浓度为25μmol/L和50μmol/L时,虽然不呈现时间依赖性,但是72h后,浓度为50μmol/L的细胞活性较低,细胞死亡较多,故浓度也会影响细胞活性,影响细胞增殖。2、白藜芦醇可以影响caspase-3蛋白的表达,从而促进细胞凋亡。白藜芦醇各个浓度的处理组在24h和48h时,caspase-3蛋白表达升高不明显,但是在72h时,caspase-3蛋白表达显著升高,呈剂量依赖型。3、眼附属器malt淋巴瘤细胞和BJAB细胞是同源细胞,因此根据白藜芦醇对于BJAB细胞的作用,推测其对malt淋巴瘤也具有一定的抑制细胞增殖作用,但是具体的实验还有待进一步研究。
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