【摘 要】
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该文系统地研究了溶栓素纯度鉴定、活性检测、蛋白定量方法,建立了溶栓素质量检测体系,该体系在蛋白类药物研发和生产过程中,具有技术上的通用性.该文系统地分析了溶栓素研制
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该文系统地研究了溶栓素纯度鉴定、活性检测、蛋白定量方法,建立了溶栓素质量检测体系,该体系在蛋白类药物研发和生产过程中,具有技术上的通用性.该文系统地分析了溶栓素研制和生产过程中相关因素对蛋白定量的干扰作用,提出并建立总蛋白质定量的评价方法,为生物制药研发过程中选择适宜的总蛋白定量方法提供新思路.该文提出以低成本的常规分离介质,在纯化初始步骤中即实现高效纯化的两种离子交换组合色谱新思想,设计并组装了相应的自动控制纯化设备,以溶栓素纯化为例进行探索,获得在工艺的低成本"起始"步骤中完成高效纯化的工艺方法,大大降低了生物制药终产品的成本,对研究工业生产工艺,具有一定指导意义.经文献检索,在国内外未见有与该研究有关的研究文献和专利报导.该文首次获得了溶栓素的二级结构,研究了在不同pH和不同温度条件下,溶栓素的二级结构变化与活性的相关性,为阐明溶栓素空间结构和功能的关系及其作用机理奠定基础.该研究发现,溶栓素N-末端可能被修饰封闭,而且溶栓素可以抗胰蛋白酶消化.根据序列比对分析,可以认为溶栓素是一种新的蛋白酶.
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