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【目的】已有的研究表明,c-Jun N-末端激酶(JNK)的激活可能参与了阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)多个主要病理损害过程。然而,在成年转基因AD小鼠模型中特异性抑制JNK的活性,能否防止AD病变的进展仍未阐明。本实验以成年APPswe/PS1d E9转基因AD小鼠为研究对象,使用JNK特异性小分子激酶抑制剂SP600125,探讨其对AD转基因小鼠认知功能障碍、脑内Aβ产生及沉积、Tau蛋白磷酸化的治疗作用及其相关机制。【材料方法】以雌性APPswe/PS1d E9转基因AD小鼠及与其相匹配的非转基因野生型C57小鼠(WT)为研究对象,使用SP600125腹腔内注射12周后断头取脑。分别采用免疫组化染色和荧光染色方法检测Aβ弥漫性淀粉样斑块和纤维性斑块的沉积情况;采用ELISA方法检测脑组织中可溶性和不可溶性Aβ1-40、Aβ1-42及Aβ寡聚体的含量变化情况;采用Western blot方法检测Tau蛋白磷酸化及影响Aβ和Tau蛋白产生的各种酶类的表达变化情况。【结果】1、以WT小鼠为对照,APPswe/PS1d E9转基因AD小鼠大脑皮质和海马中APP、过磷酸化APP(p-APP)及磷酸化JNK(p-JNK)的表达水平均显着增加;以PBS溶媒治疗的APPswe/PS1d E9转基因AD小鼠对照组相比,使用JNK特异性小分子激酶抑制剂SP600125治疗后,可以显著降低p-APP和p-JNK的含量。2、与PBS溶媒治疗对照组相比,使用SP600125治疗可以显著改善APPswe/PS1d E9转基因AD小鼠的空间学习和记忆功能。3、在APP相关代谢研究中,与PBS溶媒治疗对照组相比,使用SP600125治疗可以明显增加APPswe/PS1d E9转基因AD小鼠大脑皮层和海马组织中ADAM10(α-分泌酶主要成分)的表达,显著降低BACE1(β-分泌酶主要成分)和PS1(γ-分泌酶主要成分)的表达;进而明显增加α-分泌酶裂解产物——可溶性APPα(s APPα)的含量,同时显著降低β-分泌酶裂解产物——可溶性APPβ(s APPβ)的含量;最终显著降低转基因AD小鼠大脑皮质和海马中可溶性及不可溶性Aβ1-40、Aβ1-42和Aβ寡聚体的含量及其沉积;而对脑啡肽酶(NEP)和胰岛素降解酶(IDE)等Aβ相关降解酶的表达均无显著影响。4、在Tau蛋白的研究中,与PBS溶媒治疗对照组相比,使用SP600125治疗可以明显降低APPswe/PS1d E9转基因AD小鼠大脑皮层和海马组织中Thr205及Ser235位点过磷酸化Tau蛋白的含量;而对于可能促进Tau蛋白磷酸化的CDK5和GSK3β的表达并无显著影响。【结论】使用JNK特异性小分子激酶抑制剂SP600125治疗APPswe/PS1d E9转基因AD小鼠,可以通过抑制JNK活性显著降低磷酸化Tau蛋白含量,并通过减少APP过磷酸化、促进α-分泌酶裂解并抑制β-分泌酶裂解APP过程,进而显著降低Aβ的含量及其沉积,改善转基因AD小鼠的空间学习和记忆功能。表明使用SP600125治疗AD可以显著减少Aβ产生及Tau蛋白磷酸化等病理损害过程,改善AD相关认知功能损害。提示JNK的活化在AD病理损害中发挥着重要作用,而其特异性抑制剂SP600125可能是一种潜在的具有治疗AD作用的新型药物。